Metodo De La Placa De Contacto

MÉTODO DE LA PLACA DE CONTACTO (PLACA RODAC)

El método de contacto directo del agar con los microorganismos que se multiplican (RODAC= Replicate Organisms Direct Agar Contact) utiliza placas Petri especiales, ideales para la investi- gación de gérmenes en superfi cies. Se usa medio de cultivo TSA o diferentes medios selectivos a conveniencia. Se añade a una placa de Rodac, un medio de cultivo sólido (seleccionado en función de los microorganismos buscados), en ligero exceso, para que la superfi cie quede convexa. Las superfi cies a controlar suelen ser limpiadas periódicamente con detergentes y/o desinfectan- tes. Para realizar el recuento total de microorganismos en superfi cie, es aconsejable neutralizar los restos de detergentes y desinfectantes ya que podrían inhibir el crecimiento. Para ello se utilizará preferentemente un medio de cultivo que contenga polisorbato, histidina y lecitina (a ve- ces llamados Tween 80 y lecitina) que funcionan como neutralizantes de aldehídos, compuestos fenólicos y amonios cuaternarios, que suelen ser utilizados como desinfectantes y detergentes con actividad antibacteriana. Con esta neutralización se consigue evitar interferencias, debido a que estas sustancias no pueden inhibir el crecimiento colonial durante el periodo de incubación y por tanto no afectan a la ulterior lectura e interpretación de resultados.

Es el método ideal para examinar superfi cies lisas, duras y no porosas, pero no es muy reco- mendable en casos de superfi cies muy contaminadas, donde es más práctico el uso de medios selectivos. Si se desea controlar un grupo de microorganismos en concreto, también recurriremos a medios selectivos.

La placa de Rodac es muy laboriosa de preparar y además se deshidrata y contamina muy fácil- mente. Por ello Scharlab le suministra la placa de Rodac ya preparada, en cajas de 30 unidades repartidas en 5 blister de 6 placas cada uno. Cada blister va a su vez introducido en una bolsa totalmente sellada. Este embalaje prolonga la vida de las placas, evitando la deshidratación y contaminación. En el proceso de fabricación se utilizan todos los materiales estériles, pero si el medio lo permite, una vez terminado el proceso se irradian las cajas completas. Este proceso garantiza su estabilidad y nos permite poder entrar el material en salas blancas sin riesgo de introducir contaminación. El mismo blister, utilizado como bandeja, nos facilitará también el transporte de las placas desde el lugar de muestreo hasta la estufa de incubación.

MODO DE EMPLEO La placa se coloca sobre la superfi cie a muestrear de una forma directa, manteniéndola inmóvil y presionando. Cerrar e invertir la placa para su incubación, a temperatura y tiempo adecuados según el medio y determinación realizada.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Contar las colonias que han crecido y expresar el resultado en ufc/placa. El resultado también se puede expresar en UFC/cm2 de superfi cie. Diversos estudios han deducido que una placa de contacto sólo recoge el 0,1% de la fl ora de las superfi cies (se considera que una placa Rodac tiene 25 cm2), por tanto se recomienda que el contaje de la placa se divida por 25 y se multiplique por 1000 para poder expresar el resultado en ufc/cm2 de superfi cie estudiada.

A continuación detallamos los medios de cultivo disponibles en placa de Rodac. Si desean prepararse sus placas a partir de medio deshidratado consulten el capítulo “Medios de cultivo”.

REFERENCIA DESCRIPCIÓN PRESENTACIÓN

RECUENTO

064-PR0001

064-PR0004

064-PR0005

064-PR0020

064-PR0028 TOTAL DE

Recuento en Placa A. (PCA)

Triptona y Soja A. (TSA)

T.S.A+Polisorbato+Histidina+Lecitina

Rodac PCA+Lecitina+Polisorbato

TSA+PNasa AEROBIOS

30 p. Rodac

30 p. Rodac

30 p. Rodac

30 p. Rodac

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