ACTIVIDAD ENZIMATICA °WILMAN PIANETA, YOIMAR MARQUEZ, LAURA TEJEDA

ACTIVIDAD ENZIMATICA

°WILMAN PIANETA, YOIMAR MARQUEZ, LAURA TEJEDA

Universidad del Magdalena, Estudiantes del Programa de Ingeniería Ambiental, Facultad de Ingeniería. Mz B – Carrera 32 No 22 - 08, Santa Marta, Colombia.                                                                       °wilmanpianeta@gmail.com

RESUMEN

El objetivo de esta práctica de laboratorio fue identificar una reacción de las enzimas y su respectivo sustrato, observar la actividad de algunas enzimas en tejidos animales. Demostrar cómo afecta la temperatura, el pH y la concentración sobre la actividad de una enzima y ver la forma en que una enzima es específica para cierto sustrato, se suministró 1ml de extracto de hígado en tubos de ensayo.

 INTRODUCCIÓN

El término cinética enzimática implica el estudio de la velocidad de una reacción catalizada por una enzima y los efectos que pueden tener factores como los inhibidores. Uno de los principales estudios que se realizan en una enzima es medir el efecto en la velocidad de la reacción cuando se modifican las concentraciones del sustrato y se mantienen constantes la concentración de enzima, el pH, la fuerza iónica del medio, la temperatura, entre otros. Se evalúa la influencia de estos factores en la reacción catalizada por enzimas con la finalidad de determinar los intermediarios en una reacción y el papel que juegan en la reacción enzimática, es decir, para predecir mecanismos de reacción. Es esencial entender estos mecanismos para desarrollar nuevas herramientas moleculares, por ejemplo, para combatir enfermedades en las que se conoce a la enzima que la produce. También es usual medir la actividad enzimática con diferentes sustratos para entender su especificidad o bien, medir la actividad de la enzima de diferentes tejidos u organismos para entender cómo las diferencias en actividad están relacionadas con la función y/o la fisiología del organismo del que proceden.

MATERIALES Y MÉTODOS 

Parte A. Concentración

En esta primera parte se tomaron cuatro tubos de ensayo y a cada uno de estos se les propago un mililitro (ml) de extracto de hígado  teniendo todo esto listo se pasó a echarle 1ml de peróxido de hidrogeno al primer tubo, 2ml al segundo, 4ml al tercero y 5ml al cuarto; después de esto se observó la reacción de estos contenidos y así poder determinar que tanta actividad enzimática se realizaba.

Parte B. Temperatura °C

Para este segundo inciso tomamos tres tubo de ensayo y a cada uno de ellos se les introdujo 1 ml de extracto de hígado y seguidamente se sometió a cada uno a una temperatura diferente el primero a una temperatura fría (Baño de hielo) durante 20 minutos, el segundo a una temperatura ambiente durante 20 minutos y el tercero a una temperatura fría (agua hirviendo) durante 3 minutos; luego de este sometimiento se pasó a agregar el peróxido de hidrogeno y observar la reacción de la velocidad y que cantidad enzimática se produce con respecto a la temperatura.

Parte C. pH

En esta última parte se tomaron 3 tubos de ensayo y se les agregaron 1ml de extracto de hígado a cada uno de ellos y luego 5 gotas de Ac. Clorhídrico (acido) al primero, 5 gotas de hidróxido de sodio al segundo (base) y 5 gotas de suero fisiológico (neutro) al tercero y seguidamente ver cómo afectaría allí el pH a la velocidad de una reacción enzimática y cantidad de esta se produce.

RESULTADOS

Parte A. Concentración

Se observó que al insertar más sustrato se producía más actividad enzimática, Pero con una misma velocidad enzimática, es decir, a menos concentración de sustrato se producía  menos oxígeno y más agua pero a mayor concentración de sustrato se producía más oxígeno y menos agua

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