Actividad enzimatica- Análisis y resultados.
Enviado por Juliana Bonelo • 15 de Marzo de 2016 • Informes • 878 Palabras (4 Páginas) • 180 Visitas
Análisis y resultados
Curva de calibración
Muestra | Concentración [mg/ml] | Absorbancia |
1 | 0,000888889 | 0,158 |
2 | 0,001777778 | 0,296 |
3 | 0,002666667 | 0,434 |
4 | 0,003555556 | 0,565 |
5 | 0,004444444 | 0,708 |
[pic 1]
Para la realizar los experimentos en cada tipo de comparación se encontró la curva de calibración con la siguiente ecuación, con la cual se encontraran las concentraciones de los productos de cada uno de los experimentos, estos serán dados en las unidades mg/ml, notar que se despejo x dado que esta es la concentración en la formula.
[pic 2]
Actividad enzimática vs pH
muestra | Vo [mg/ml]/min | absorbancia | ph |
1 | 0,000267226 | 0,431 | 3,0 |
2 | 0,000392964 | 0,629 | 4,0 |
3 | 0,000475519 | 0,759 | 5,0 |
4 | 0,000443132 | 0,708 | 5,3 |
5 | 0,000395504 | 0,633 | 5,6 |
6 | 0,00048949 | 0,781 | 6,2 |
[pic 3]
Es muy importante en la búsqueda de las condiciones ideales encontrar el pH óptimo en las cuales las enzimas a utilizar tengan su mejor desempeño, durante este experimento se logró identificar cual sería el pH óptimo de la enzima utilizada siendo este 5,0 como podemos ver en el experimento del mismo tipo de enzima concuerda con el pH optimo reportado, ( la determinación del pH óptimo de la enzima purificada usando como sustrato p -nitrofenil fosfato fue de 5,0 y 5,2 con fenil fosfato )(Guija E, Hank H, 2010). Aunque nuestro sustrato utilizado fue el de glicerofosfato de sodio, esto da un rango muy similar con el encontrado en el laboratorio.
Actividad enzimática vs temperatura
muestra | Vo [mg/ml]/min | absorbancia | T °C |
1 | 0,0022 | 0,398 | 0 |
2 | 0,0028 | 0,507 | 18 |
3 | 0,0034 | 0,605 | 37 |
4 | 0,0036 | 0,634 | 60 |
5 | 0,0023 | 0,411 | 92 |
[pic 4]
Para la temperatura se puede identificar su punto máximo entre 55 °C Y 60°C en este punto es el punto donde la enzima produce la mayor cantidad de producto, dado que al pasar esta temperatura la cantidad de producto realizado se disminuye considerablemente y antes de esto está en las condiciones necesarias para producir a su mayor capacidad
Actividad enzimática vs [enzima]
muestra | Vo [mg/ml]/min | absorbancia | [e][mg/ml] |
1 | 1,53E-06 | 0,037 | 2,10E-05 |
2 | 3,02E-06 | 0,063 | 4,20E-05 |
3 | 2,39E-06 | 0,052 | 6,30E-05 |
4 | 1,92E-05 | 0,347 | 1,26E-04 |
5 | 2,52E-05 | 0,451 | 1,68E-04 |
La relación existente entre la concentración de enzima y la actividad enzimática es evidente como se observa en la siguiente gráfica, entre más concentración de enzima exista mayor cantidad de producto se generó a partir de esta, dejando la concentración de sustrato constante.
[pic 5]
Aunque esta tendencia no es completa como podemos ver en la gráfica no se puede identificar un punto como óptimo para este sistema dado que subió y no se redujo su actividad enzimática al superar cierto punto por el contrario este incremento
Actividad enzimática vs [sustrato]
muestra | Vo[mM]/min | absorbancia | [S][Mm] |
1 | 69,58 | 0,416 | 5 |
2 | 70,44 | 0,421 | 10 |
3 | 79,87 | 0,476 | 20 |
4 | 100,96 | 0,599 | 40 |
5 | 89,30 | 0,531 | 60 |
6 | 105,93 | 0,628 | 80 |
7 | 121,02 | 0,716 | 100 |
En la actividad enzimática podemos encontrar una tendencia similar a la que encontramos en la enzimática entre mayor sea la cantidad de sustrato mayor va a ser la cantidad de producto producido aunque como en el caso anterior va a ser tender a una constante cuando alcanza cierta cantidad de sustrato
[pic 6]
En el experimento realizado podemos encontrar que realizado en el laboratorio podemos encontrar un error a la hora de generar los datos dado que a 60mM la curva no debería bajar o tener una actividad enzimática menor que a 40mM un probable error humano pudo generar este cambio en las concentraciones de esta manera.
...