Biología Molecular

TLR:

🡪 Receptores que se encuentran tanto en superficie celular (transmembranales) como a nivel intracelular.

🡪 Receptores principalmente involucrados en reconocimiento y montaje o ayuda de montaje de respuesta a nivel de respuesta inmune innata.

🡪 Receptores inicialmente descritos en la mosca Drosophila, como participante en la respuesta inmune de esta.

🡪 Posteriormente se identificaron en células de eucariotas y por esto se denominaron TLRS o parecidos a Toll.

🡪 Hay varios de estos receptores que se encuentran en diferentes ubicaciones en la célula y que se encuentran en las células nucleadas de los eucariotas.

🡪 Reconocen principalmente estructuras, sustancias y secuencias que son comunes de los microorganismos, es decir, los patrones moleculares asociados a patógenos – PAMPS (son el ligando de los TLR)

🡪  Se caracterizan por tener un dominio rico en leucina, su estructura es muy parecida a los receptores para algunas citoquinas, por esto, inicialmente se les atribuyo algunas funciones en activación de citoquinas pues al ligarse el PAMP ellos se activaban de manera similar a los receptores de citoquinas y así eran capaces de inducir una respuesta inmune mediada por citoquinas (innata).

🡪 Se expresan diferencialmente según célula y la única que tiene todos los TLR descritos es la célula dendrítica (mejores células presentadoras de antígeno).

MONOCITOS Y MACRÓFAGOS 🡪 Expresan la gran mayoría de TLR excepto TLR – 3.

CÉLULAS DENDRITICAS 🡪 Expresan casi todos los TLR pero depende del origen de estas expresan en mayor cantidad unos u otros TLR.

MONOCITOS, CÉLULAS ENDOTELIALES, NEUTRÓFILOS, BASÓFILOS Y DENDRITICAS 🡪 Todos expresan TLR – 2. 

🡪 Los TLR ubicados en membrana para que se señalicen usan dos vías dependiendo del TLR:

• VÍA COMPARTIDA O VÍA COMÚN
• VÍA ESPECIFICA

PAMP DE RECONOCIMIENTO DE ALGUNOS TLR:

TLR – 2 🡪  Lipoproteínas de microorganismos Gram positivos, hemaglutinina.

TLR – 4 🡪 Lipopolisacáridos de bacterias Gram negativas, proteínas de choque térmico y trizol.

TLR – 3 🡪 RNA viral de doble cadena y poly I:C de los microorganismos.

TLR - 7; TLR - 8 🡪 RNA de cadena sencilla.

TLR – 9 🡪 DNA en las islas CPG del DNA de las bacterias.

TLR – 11 🡪 Estructuras especificas en la E. Coli uropatógena.

TLR – 5 🡪 Identifica la flagelina.

• VÍA INDEPENDIENTE DE MyD - TLR – 3 🡪  

Tienen el receptor sobre la membrana de la célula (receptor de superficie celular) donde son señalizados, es decir, donde ligan su PAMP y pasan la señal por el tallo transcelular, se señaliza el tallo intracelular y esta se da porque a nivel intracelular estos tienen unas regiones ricas en ciertos aminoácidos y estos se fosforilan lo que ocasiona que inmediatamente se fosforilen otras sustancias, otras proteínas que estén a nivel citoplasmático por lo que se activa la proteína TRIP la cual activa a NEMO que cuando se fosforila se activa IKK alfa e IKK beta (quinasas) y cuando estas se fosforilan queda activado el NF – KB (factor nuclear potenciador de las cadenas ligeras kappa de las células b activadas) y este se transloca al núcleo lo que genera que NF – KB se pegue en sitios y genes específicos para iniciar transcripción de genes asociados o relacionados con citoquinas que por lo general son de tipo proinflamatorio.

• VÍA MyD 88 o VÍA DEPENDIENTE DE MYD – TLR – 9 🡪

El TLR – 9 se pega a su PAMP, se señaliza el receptor, se señaliza a nivel intracelular, este se fosforila y activa a la proteína MyD 88 la cual activa la IRAK y esta activa a TRAP- 6 lo que activa a NF – KB y sucede lo mismo que en la vía anterior.

TRAP – 6 ACTIVADA 🡪 Puede activar otras quinasas como:

• TRAP – 1
• MKK6 🡪 Activa a factor junk (altamente expresado en linfocitos así que hace que algunos linfocitos se activen después de activarse la vía innata generando una potencialización de la respuesta adaptativa) y el factor P – 38.

¿Cómo la célula dentro de ella produce sustancias que fueron generadas por un estímulo y para dónde van estas sustancias?

Tráfico de sustancias 🡪 Principalmente proteínas ya que generan un efecto en la célula y llevan a cabo una función en esta.

🡪 En el citosol se producen sustancias que deben ser transportadas a diferentes organelos y también habrá otras que desde el núcleo llegan al citosol donde son modificadas para producir otras sustancias o devolver al núcleo.

🡪 En el retículo endoplásmico se sintetizan o arreglan proteínas que se dirijan hacia el aparato de Golgi y que de aquí pasen a vesículas excretoras, vayan a la superficie celular, salgan a lisosoma o se dirijan a endosoma.

🡪 Puede haber sustancias o proteínas provenientes de la superficie celular que entran al interior de la célula.

Existen dos tipos de transporte de proteínas 🡪 

• Transporte citosólico:

Se lleva a cabo desde citosol o lo producido aquí hacia los peroxisomas, los cloroplastos, las mitocondrias.

• Transporte vesicular – Vía secretora de proteínas:

Se lleva a cabo desde retículo endoplásmico hacia superficie celular, lisosomas o endosomas, aquí se empacan las proteínas en una vesícula ya sea del retículo endoplásmico o del aparato de Golgi para ser transportadas a otros lugares pues no hay tráfico libre de proteínas.

Proteínas que se sintetizan son proteínas que son parte integral de cualquiera de las partes de los organelos mencionados,

VÍA CITOSÓLICA 🡪

Se tiene proteína que se secreto en citoplasma, se tiene RNA que se convierte en proteína por ribosoma y la proteína producida puede ir para cualquier organelo intracelular (ribosomas libres en citoplasma)

 ¡Proteínas que van para mitocondria serán parte integral de la membrana interna o membrana externa o espacio mitocondrial; proteínas que están siendo sintetizadas por los ribosomas citosólicos libres, son proteínas que harán parte del citoesqueleto, del cloroplasto, del núcleo, del peroxisoma.!

VÍA SECRETORA 🡪

Se tiene RNA que se sintetiza en ribosoma a proteína y esta tiene una dirección hacía retículo endoplásmico y allí pasa a aparato de Golgi y de ahí puede ir a superficie celular y secretarse, puede ir a lisosoma o puede quedarse haciendo parte de membrana plasmática (ribosomas unidos a la membrana)

¡Proteínas que están unidos a membrana del retículo endoplásmico harán parte del retículo endoplásmico, del aparato de Golgi, de los lisosomas o saldrán de la célula.!

• Las proteínas tienen que plegarse para adquirir estado funcional.
• El plegamiento puede ser espontaneo 🡪 Por la carga de la proteína ella misma entre sus aminoácidos adquiere atracción específica y se pliega con ayuda de esas cargas químicas. Se ayudan con proteínas chaperonas o chaperoninas, proteínas disulfuro isomerasa y peptidil isomerasa 

CLASIFICACIÓN DE PROTEÍNAS 🡪 

• Forma:

Fibrosas 🡪 Son largas, poseen muchos aminoácidos y no son tan complejas en estructura (la mayoría de veces llegan a forma secundaria), son insolubles en agua (hidrofóbicas)

Globulares 🡪  Son mucho más complejas, se pliegan entre sí de forma tal que queden compactas, se asocian a otras sustancias (simbiosis) para poder ser funcionales.

• Composición química:

Simples 🡪 Si se divide la secuencia de aminoácidos que compone la proteína solamente tendré aminoácidos componiendo la proteína.

Conjugadas 🡪 Si se rompe la proteína se tienen aminoácidos y otro tipo de sustancias (azúcares, lípidos ..) asociados a la proteína para darle funcionalidad.

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