Biologia General, Reconocimiento De Lipidos,glucidos, Etc

PRACTICA N° 3

RECONOCIMIENTOS DE GLÚCIDOS

1. Reacción de Fehling

Se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, así como para detectar derivados de esta tales como la sacarosa o la fructosa.

El reactivo de Fehling consta de:

-Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O

-Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disueltos en agua

En medio alcalino, el cobre procedente del CuSO4 se encuentra en forma de hidróxido cúprico, y se forma la correspondiente sal Na2SO4. Cuando el Cu(OH)2 (de color azul) se calienta en presencia de un compuesto reductor se forma óxido cuproso (de color rojo ladrillo).

CuSO4 +2NaOH -------Δ-------> Cu (OH)2+Na2SO4 (azul verdoso)

Cu (OH)2+ RCOH -------Δ-------> Cu2O+RCOOH+H2O (rojo ladrillo)

• Referencia: Nelson, D.L. y Cox, M.M. (2005). Lehninger Principios de Bioquímica. 4ª edición. Ed. Omega.

2. Reacción de Lugol

El lugol es una disolución acuosa de yodo y yoduro potásico que sirve para averiguar si, en una disolución de azúcares no reductores (reacción de Fehling negativa), existe el polisacárido almidón (prueba de lugol positiva).

El almidón es una mezcla de amilosa y amilopectina. Cuando el almidón se pone en contacto con unas gotas de lugol, toma un color azul-violeta característico (la amilosa se colorea de azul oscuro a negro y la amilopectina se colorea entre naranja y

amarillo). Se trata de una reacción no química, en la que se forma un compuesto de inclusión del yodo en el interior de las hélices de la amilosa. Esta inclusión es reversible y está condicionada por la temperatura.

• Referencia: Nelson, D.L. y Cox, M.M. (2005). Lehninger Principios de Bioquímica. 4ª edición. Ed. Omega.

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

1. Saponificación

Esta transformación es una reacción química que consiste básicamente en:

Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos. Éstos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.

• Referencia: Mathews, C.K., Van Holde, K.E. y Ahern KG (2002). Bioquímica. 3ª edición. Ed. Addison Wesley/Pearson Education. Madrid.

2. Tinción

Los colorantes para grasas son más solubles en las propias grasas que en el medio en el que van disueltos. Así, al bañar la grasa con la solución del colorante, éste tiende a disolverse en la grasa que se va cargando del colorante. Por regla general estos colorantes siempre van en solución alcohólica o bien en una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua. Por eso el sudan si se mezcló con el aceite.

• Referencia: Mathews, C.K., Van Holde, K.E. y Ahern KG (2002). Bioquímica. 3ª edición. Ed. Addison Wesley/Pearson Education. Madrid.

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