Bioquimica

FRACCIONAMIENTO DE TEJIDOS EN SUS PRINCIPALES BIOMOLECULAS: CARBOHIDRATOS,LIPIDOS,PROTEINAS Y ACIDOS NUCLEICOS

YESID ANDREY ROJAS MOLINA 164003017

CARMEN ANDREA RODRIGUEZ ARIAS 164002945

RESUMEN

Se empleó el método de solubilidades diferenciales y de centrifugación para el fraccionamiento de un tejido animal en sus principales constituyentes en términos de sus biomoléculas obteniendo como resultado la separación de lípidos, proteínas, carbohidratos y ácidos nucleicos para posteriores estudios.

INTRODUCCIÓN

El fraccionamiento celular se emplea para separar le célula en diferentes componentes permitiendo el estudio de estos sin interferencia de otras partes. Empezando se eligió un tejido adecuado con criterio de facilidad para un buen fraccionamiento, se utilizo para este las técnicas de centrifugación de propiedades de solubilidad diferencial que consiste en la separación debido a las diferencias que existen en las propiedades de los carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, presentaran diferentes solubilidades en solventes orgánicos al igual que en ácidos del tipo tricloroacético tomando en cuenta la temperatura. Por esto es posible separarlos utilizando sus diferentes solubilidades al momento de romper sus membranas.

En carbohidratos los monosacáridos son estables a baja temperatura en medio ácido y son solubles en solución de ácido tricloroacético

(ATA); a diferencia de los lípidos, que son poco solubles y de las proteínas que son insolubles; por otra parte los ácidos nucleicos también presentan insolubilidad en ATA, basado en este principio de solubilidad al someter un tejido a este medio y centrifugarlo en la suspensión resultante obtenemos azucares y en el residuo los demás constituyentes.

El etanol-éter-cloroformo se utiliza para la obtención de lípidos a partir del residuo que se formó con la solución anterior debido a que los lípidos son solubles en estos compuestos orgánicos, enseguida utilizamos cloruro de sodio al 10% caliente ya que se desnaturalizan las proteínas y de esta forma es posible la separación con ácidos nucleicos, este ultimo se obtiene a partir de la solución con etanol adquiriendo un precipitado por centrifugación.

las proteínas son biopolímeros grandes formados por aminoácidos que entre sus múltiples funciones están las de tipo estructural y la función catalítica.

los carbohidratos son un grupo de biomóleculas abundantes, como por ejemplo los azúcares sencillos o glucosa, sus polímeros almidón y algunos derivados .en cuanto a los lípidos, son los componentes importantes de las membranas biológicas, los más sencillos son los ácidos grasos, luego están algunas moléculas más grandes como los fosfolípidos y algunas moléculas más complejas como el hdl.

los ácidos nucleicos, adn y arn, son biopolímeros conformados por los nucleótidos, los cuales a su vez están formados por un azúcar ribosa, una base nitrogenda como la citosina y al menos un grupo fosfato

el tejido seleccionado fue higado de pollo del cual se tomaron 3 gramos ,fue cortado en trozos pequeños,posteriormente se le adiciono 0,7 g de arena lavada y se macero en el mortero con 4.5 ml de ATA (ácido tricloroacético) al 10% se centrifugo por 5 minutos a una fuerza de 2500 rpm adquiriendo carbohidratos; al residuo resultante se le hizo la extracción con etanol-eter-cloroformo seguido por la centrifugación obteniendo lípidos, la parte restante es sometida con NaCl al 10% en baño maria por 20 min. y luego por centrifugación consiguiendo como residuo proteínas desnaturalizadas y de sobrenadante acidos nucleicos obtenido al adicionar etanol al 96 % a una temperatura de 0°C y en centrifugación por 5 min.

Resultados

Se

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