CIENCIAS BIOLOGICAS PRACTICA DE LABORATORIO N° 6 y 7

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE ZOOTECNIA

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CIENCIAS BIOLOGICAS

PRACTICA DE LABORATORIO N° 6 y 7[pic 2]

• DOCENTE: CARLOS LEÓN TORRES

• ALUMNA: CARBAJAL RUEDA, DARA

• CURSO: BIOQUÍMICA

TRUJILLO-PERÚ

2019

1. INTRODUCCIÓN

Los organismos vivos necesitan producir energía indispensable para cumplir sus diferentes funciones metabólicas. Esta energía la obtienen principalmente a partir del consumo de carbohidratos como la glucosa, que es la moléculamayormente utilizada por los sistemas biológicos. La glucolisis, por medio de la cual la glucosa se degrada parcialmente, almacenándose parte de la energía bajo laforma de ATP, tiene como producto final al piruvato. Dependiendo del microorganismo y tejido que lo metabolizay de la presencia o ausencia de oxígeno, el piruvato se convierte en alcohol o lactato. Desde el punto de vista evolutivo, se acepta que el metabolismo ha ido perfeccionándose, adquiriendo nuevasmodalidades a medida que los seres vivos se desarrollaban evolutivamente más complejos. Así, tenemos que lasbacterias, que son menos evolucionadas, presentan un predominio del ciclo anaeróbico, debido a que estos microorganismos carecen de sistemas enzimáticos para su catabolismo aeróbico. En cambio, en animales más evolucionados, como es el caso de los mamíferos y aves, los carbohidratos sufren unadegradación completa; es decir, pasan por el catabolismo anaeróbico y aeróbico. En condiciones anaerobias, algunos microorganismos, en particular las levaduras, producen alcohol etílico y CO2. En cambio, los tejidos de los mamíferos solo producen ácido láctico en ausencia de oxígeno. Algunos tejidos se distinguen metabólicamente por el hecho de realizar una activísima glucólisis, incluso enpresencia de bastante oxígeno; entre estos tejidos tenemos el cerebro y las células cancerosas. La reacción global neta de la glucolisis en anaerobiosis es: Glucosa + 2 ADP + 2Pi 2 Lactato + 2ATP + 2H2O. La presente experiencia práctica de laboratorio, tiene como finalidad la demostración del consumo de glucosa 2 por Saccharomyces cerevisiae (levadura de pan o vino).

1. MATERIAL Y MÉTODO

1. Material biológico

• Saccharomyces cerevisia “Levadura del pan o de vino” suspensión al 10%

1. Material y equipo de laboratorio

• Sistema de fermentación Matraz de 50 m L de capacidad.
• Tampón de jebe atravesado por un tubo de vidrio, manguerilla y pinza
• Bomba al vacío
• Gradilla de tubos de 16 x 125 mm
• Pipeta de 1,2,5 y de 10 m L
• Embudos de vidrio y papel filtro Watman N° 1
• Cocina eléctrica y pocillo de 500 m L
• Espectrofotómetro

1. Reactivos y soluciones

• Buffer de acetato 0.1 M p H 5
• Glucosa 0.2 M
• Ácido sulfúrico 2/3 N
• Tungstato de sodio 10%
• Solución cúprico alcalina
• Solución fosfomolibdica
• Agua destilada

1. PROCEDIMIENTO:

1. SISTEMA DE INCUBACIÓN

1. En un matraz de 50 m L se adicionó

1. Buffer acetato 0.1 M pH 5…………………………………………………………………12.0 m L
2. Glucosa 0.2 M en Buffer acetato 0.1 M p H 5……………………………………..1.8 m L
3. Suspensión de levadura 10% en Buffer acetato…………………………………1.5 m L

1. Se mezcló y se tomó una alícuota de 1 m L colocándose en un tubo que contiene 1 m L de   Ácido sulfúrico 2/3 N y dejar en reposo como mínimo 2 minutos. Esta alícuota correspondía a la muestra tiempo cero (0 minutos)
2. Luego se tapó el matraz con el tapón de jebe y se empezó a extraer el aire con una bomba de vaco durante 3 a 5 minutos. De inmediato se procedió a la incubación durante 1 hora.
3. Después que transcurrió 1 hora, se tomó la segunda muestra y procedimos como en el paso 2
4. A la muestra de los pasos 2 y 4, se les adicionó 1 m L Tungstato de sodio 10%. Se mezcló vigorosamente, y se dejó en reposo por 2 minutos. Luego se adicionó 7 m L de agua destilada, finalmente se mezcla por inversión y se procede a colar.

1. DETERMINACIÓN DEL AZUCAR RESIDUAL 

El azúcar residual se determina con los filtros del paso 5, utilizando el siguiente sistema.

Luego se mezcló por inversión y se dejó en reposo durante 10 minutos.

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