Cromatografía en capa fina.

¿Qué es la Cromatografía en Capa Fina?

• Es la técnica que utiliza una placa inmersa verticalmente. Esta placa cromatográfica consiste en una fase estacionaria polar (comúnmente se utiliza sílica) adherida a una superficie sólida. La fase estática es una superficie uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual debe ser de vidrio, aluminio, poroso u otra superficie. Para realizar la CCF, se debe apoyar la placa cromatográfica sobre algún recipiente o cámara que contenga, la fase líquida de aproximadamente un centímetro (la distancia entre el principio de la placa y la muestra que se desea analizar).

¿Cómo se divide la CCF?

• FASE MÓVIL. Se hace mover otra sustancia sobre la mezcla que ya está sobre el soporte de la fase estática, por ejemplo, un líquido que se mueve por el papel con la mezcla. En la fase móvil empezará el proceso de separación de los componentes de la mezcla al moverse de distintas velocidades por el líquido de los diferentes compuestos y/o componentes de la mezcla sobre el papel.

• FASE ESTACIONARIA O ESTÁTICA. La mezcla se coloca sobre un soporte fijo, por ejemplo, papel. En esta fase tenemos ya la mezcla sobre un soporte, en nuestro ejemplo un papel. (No se mueve y tendrá a retener las sustancias en mayor o menor grado).

Dependiendo de la naturaleza de fase estática y de la fase móvil se pueden distinguir distintos tipos de cromatografía:

a) Cromatografía sólido – líquido (sólido, fase estática y líquido, fase móvil).

b) Cromatografía líquido – líquido (líquido, fase estática, anclando a un soporte sólido).

c) Cromatografía líquido – gas (líquido, fase estática, no volátil impregnado en un sólido, fase móvil).

d) Cromatografía sólido – gas (sólido, fase estática y gas, fase móvil).

Según el tipo de interacción que se establece entre los componentes de la mezcla y la fase móvil y estacionaria podemos distinguir entre:

a) Cromatografía de adsorción. La fase estacionaria es un sólido polar capaz de adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar.

b) Cromatografía de partición. La separación se basa en los diferentes componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil, que son ambas líquidas.

c) Cromatografía de intercambio iónico. La fase estacionaria es un sólido que lleva anclados grupos funcionales ionizable cuya carga se puede intercambiar por aquellos iones presentes en la fase móvil.

De acuerdo con la forma de lecho cromatográfico:

• Cromatografía plana. Se realiza sobre papel y otro material sólido. Suele llamarse “en capa fina” o “en capa delgada” porque la fase estacionaria recubre un soporte plano y rígido.

• Cromatografía en columna.

F. M. líquida, F. E. sólida: columnas de varios mm de diámetro y varios cm de longitud.

F. M. gas, F. E. sólida: columnas de unos 5 mm de diámetro y 1-20 m de longitud.

F. M. gas, F. E. líquida: columnas “capilares”, con menor diámetro y 30-100 (incluso más) m de longitud.

Funcionamiento de una columna, mostrando la carga de la muestra y diversos momentos a lo largo de la elución:

1. Muestra depositada sobre el lecho cromatográfico.

2. La muestra penetra en el lecho

3. Se añade fase móvil

4. Comienza la separación de los componentes de la muestra.

5. Eluye el primer componente.

6. Eluye el segundo componente.

De acuerdo con el estado físico de las fases:

• Cromatografía de gases. Con fase móvil gaseosa. (Cromatografía gas-líquido. Cromatografía gas-sólido).

• Cromatografía líquida. Con fase móvil líquida. (Cromatografía líquido-líquido. Cromatografía líquido-sólido).

• HTPL.

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