CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

PRÁCTICA Nº 10 (CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF))

I. Objetivos:

• Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, (ccf), sus características y los factores que en ella intervienen.

• Calcular valores de Rf de varias sustancias y correlacionarlo a la selección adecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.

• Aplicar la técnica de cromatografÍa en capa fina como criterio de pureza e identificación de sustancias.

II. Marco teórico:

Concepto de cromatografia

La cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más compuestos por distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fase móvil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: sólido-liquido (capa fina, papel o columna), liquido-liquido y gases-liquido (fase vapor).

Todas las técnicas cromatográficas dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido.

Todos los dolidos finalmente pulverizados tienen el poder de absorber en mayor o menor grado otras sustancias sObre su superficie; y, similarmente' todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía.

Concepto de Rf

Rf es el registro, es una relación de distancias, y se define como:

Rf= (a) distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicación

(b) distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente.

El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra (tipo de adsorbente, eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturación, etc"). Tiene una reproducibilidad de t 20%, por lo que es mejor correr duplicados de la misma Placa.

Cromatografía en capa fina

En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeño espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascenderá, por capilaridad, por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de ésta produciendo "manchas" de los componentes.

En la cromatografía en capa fina (ccf), el grado de elución de las sustancias depende tanto de su profia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado' El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rígido,

quá pueoen ser placas de vidrio, aluminio o poliéster. Los tamaños de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 't0 x20 y

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