Cromatografia

OBJETIVOS

Demostrar que la cromatografía constituye una técnica valiosa para separar mezclas de compuestos, efectuar purificaciones, determinar homogeneidad (pureza) de sustancias químicas y su identificación así como su control en producción técnica

CONCEPTOS PREVIOS

Se puede definir cromatografía como la "Técnica física de separación en las que los componentes de una muestra se distribuyen en dos fases: una de ellas permanece fija(fase estacionaria) mientras que la otra se mueve(fase móvil) en contacto con ella en una dirección definida”.

Clasificación de las técnicas cromatografías

1. Según el estado físico de las fases:

a. Cromatografía Gas-Liquido: este tipo de cromatografía utiliza como fase móvil un gas y como fase estacionaria un liquido

b. Cromatografía Gas- Solido: esta modalidad de cromatografía se caracteriza por tener como fase móvil un gas y como fase estacionaria un solido

c. Cromatografía Liquido-Liquido: en este caso la fase móvil, al igual que la fase estacionaria es un líquido.

d. Cromatografía Líquido-solido: en este tipo de cromatografía la fase móvil es un líquido y la fase estacionaria es un solido

2. Según el mecanismo de separación :

a. Cromatografía de adsorción: los componentes de la muestra son retenidos mediante adsorción selectiva en la superficie de un sólido de elevada superficie específica que constituye la fase estacionaria. Las moléculas de soluto y disolvente (fase móvil) compiten por las posiciones en el adsorbente. Este mecanismo es el más habitual en cromatografía liquido-solido

b. Cromatografía de reparto: la fase estacionaria es un liquido que se encuentra impregnado en un soporte solido. El soluto se reparte entre la fase estacionaria liquida y la fase móvil de acuerdo con su solubilidad en cada una de ellas

c. Cromatografía de intercambio iónico: la fase estacionaria es un solido que contiene grupos cargados positiva o negativamente, teniendo la capacidad de separar especies iónicas. Los solutos de carga opuesta a la fase estacionaria son atraídos por esta mediante fuerzas electrostáticas.

d. Cromatografía de exclusión molecular: en este tipo de separación cromatografía, también llamada de filtración o de permeaciòn en gel, la fase estacionaria está constituida por un polímero entrecruzado de tamaño de poro definido. Las moléculas grandes, no compatibles con el tamaño del poro, siguen su avance, mientras que las más pequeñas quedan retenidas en los intersticios del gel. Esta modalidad cromatografía es útil para especies neutras de alto peso molecular realizándose la separación en función de su tamaño.

e. Cromatografía de afinidad: permite la separación de mezclas por su interacción especifica con un determinado ligando la actividad: enzima-sutrasto, antígeno-anticuerpo.

3. Según la disposición o configuración de la fase estacionaria

a. Cromatografía en columna: la fase estacionaria se encuentra empaquetada en el interior de una columna generalmente fabricada de acero, polímero o vidrio.

b. Cromatografía plana

• Cromatografía en capa fina: la fase estacionaria está extendida sobre un soporte solido inerte de vidrio, plástico o aluminio. La muestra para análisis se aplica por medio de un tubo capilar sobre la superficie de una capa fina adsorbente en forma de banda o punto

• Cromatografía en papel: se denomina de esta forma a la cromatografía plana que emplea celulosa como fase estacionaria.

Adsorbente

Se le conoce como la fase inmóvil la cual debe reunir ciertas características

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