Demanda Quimica de Oxigeno

DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO

1. Discusión general

a) principio. El método consiste en llenar con muestra, hasta rebosar, un frasco hermético del tamaño especificado, e incubarlo a la temperatura establecida durante 5 días. El oxígeno disuelto se mide antes y después de la incubación, y la DBO se calcula mediante la diferencia entre el OD inicial y el final. Debido a que el OD se determina inmediatamente después de hacer la dilución, toda la captación de oxígeno, incluida la que ocurre durante los 15 primeros minutos, se incluye en la determinación de la DBO.

b) toma de muestras y almacenamiento: las muestras para el análisis de la DBO pueden degradarse significativamente mientras están almacenadas, entre su recogida y el análisis, y como resultado producir valores de DBO bajos. Hágase mínima la reducción de la DBO analizando la muestra inmediatamente o enfriándola hasta una temperatura próxima a la de congelación durante su almacenamiento. Sin embargo, aun a baja temperatura, redúzcase el tiempo de mantenimiento a un mínimo. Caliéntense las muestras enfriadas a 20 °C ante del análisis.

1) muestras tomadas al azar: si se va a iniciar el análisis en el plazo de 2 horas a partir de la toma de la muestra. El almacenamiento en frio es necesario. Si el análisis no se va a iniciar en dicho plazo, consérvese la muestra a, o por debajo de 4°C desde el momento de su recogida. Comiéncese el análisis en el plazo de seis horas a partir de la toma; cuando esto no sea posible porque el punto de recogida de la muestra este lejos del laboratorio, almacénese a, o por debajo de 4°C e infórmese de la duración y temperatura del almacenamiento en los resultados. En ningún caso se debe empezar el análisis después de 24 horas de la toma de muestras al azar. Cuando estas van a ser utilizadas para fines de regulación, háganse todos los esfuerzos posibles por enviar las muestras para su análisis en el plazo de 6 horas después de su recogida.

2) muestras mixtas: consérvese las muestras a, o por debajo de 4°C durante la mezcla. Limítese el periodo de mezcla de 24 horas. Utilícense los mismos criterios que para el almacenamiento de muestras tomadas al azar, empezando la determinación del tiempo de mantenimiento a partir del final del periodo de mezcla. Infórmese del tiempo y las condiciones de almacenamiento como parte de los resultados.

2. Instrumental

a) botellas de incubación, capacidad de 250 a 300 mL. Límpiense los frascos con detergente, enjuáguense perfectamente y séquense antes de usarlos. Como precauciones contra la entrada de aire en la botella durante la incubación utilícese un cierre hidráulico. Para conseguir uno satisfactorio inviértanse los frascos en un baño de agua o échese agua a la boca ensanchada de las botellas de DBO especiales. Colóquese una taza de papel o de plástico o una caperuza de papel aluminio sobre la boca ensanchada de la botella para reducir la evaporación del cierre hidráulico durante la incubación.

b) incubador de aire o baño de agua, controlado por termostato a 20°C ±1°C. Elimínese toda la luz para evitar la posibilidad de producción fotosintética de OD.

3. Reactivos

a) solución de tampón fosfato: disuélvanse 8.5g de KH2PO4, 21.75 g de K2HPO4, 33.4 g de Na2HPO4∙7H2O y 1.7 g de NH4Cl en unos 500 mL de agua destilada y dilúyase hasta 1 l. el pH de la solución debería ser de 7.2 sin ajustes adicionales. Deséchese el reactivo (o cualquiera de los siguientes reactivos) si hay algún signo de crecimiento biológico en frasco de reserva.

b) solución de sulfato de magnesio: disuélvanse 22.5 g e MgSO4∙7H2O en agua destilada y dilúyase hasta 1 l.

c) solución de cloruro de calcio: disuélvanse 27.5 g de CaCl2 en agua destilada y dilúyase hasta 1 l.

d) solución de cloruro férrico: disuélvanse 0.25 g de FeCl3∙6H2O en agua destilada y dilúyase hasta 1 l.

e) soluciones acida y básica, 1N, para neutralización de muestras residuales cáusticas y acidas.

1) acida: lentamente y mientras se agita, añádanse 28 mL de ácido sulfúrico concentrado a agua destilada. Dilúyase hasta 1 l.

2) básica: disuélvanse 40 g de hidróxido sódico en agua destilada. Dilúyase hasta 1 l.

f) solución de sulfito sódico: disuélvanse 1.575 g de Na2SO3 en 1000 mL de agua destilada. Esta solución no es estable; debe prepararse a diario.

g) inhibidor de la nitrificación: 2-cloro-6-(tricloro metil) piridina.

h) solución de glucosa-acido glutámico: séquense glucosa de calidad para reactivos y acido glutámico de la calidad para reactivos a 103°C durante una hora. Añádanse 150 mg de glucosa y 150 mg de ácido glutámico a agua destilada y dilúyase hasta 1 l. prepárese siempre inmediatamente antes de usarla.

i) solución de cloruro de amonio: disuélvanse 1.15 g de NH4Cl en unos 500 mL de agua destilada, ajústese el pH a 7.2 con solución de NaOH, y dilúyase hasta 1 l. la solución contiene 0.3 mg N/mL.

4. Procedimiento

a) preparación de agua de dilución: colóquese el volumen deseado de agua en un frasco adecuado y añádase 1 mL de las soluciones de tampón fosfato, de MgSO4, de CaCl2 y de FeCl3/l de agua.

Antes de usar el agua de dilución debe ponerse a una temperatura de 20°C. Satúrese con OD agitando en una botella parcialmente llena o aireando con aire filtrado libre d materia orgánica. Alternativamente, almacénense en frascos taponados con algodón durante el tiempo suficiente para que el agua se sature de OD. Protéjase la calidad del agua utilizando material de vidrio, tubos y frascos limpios.

b) control del agua de dilución: utilícese este procedimiento como una comprobación de la calidad del agua de dilución.

Si la depleción de oxígeno del agua candidata excede 0.2 mg/l, obténgase una muestra de agua satisfactoria mejorando la purificación, o de otra fuente, alternativamente, si se inhibe la nitrificación, almacénense el agua de dilución, sembrada tal como se ha especificado antes, en una habitación oscura a temperatura ambiente hasta que la captación de oxigeno se haya reducido lo suficiente para cumplir los criterios de comprobación del agua de dilución. Compruébese la calidad del agua de dilución almacenada que se está usando, pero sin añadir simiente al agua de dilución almacenada para mejorar su calidad. No se recomienda su almacenamiento cuan la DBO se va a determinar sin inhibir la nitrificación ya que pueden desarrollarse organismos nitrificantes durante este tiempo. Compruébese el agua de dilución almacenada para determinar si sigue habiendo suficiente amoniaco después del almacenamiento. Si no es así, añádase solución de cloruro de amonio para proporcionar un total de o.45 mg de amoniaco/l en calidad de nitrógeno. Si el agua de dilución no ha sido almacenada para mejorar su calidad, añádase suficiente material de siembra como para producir una captación de OD de 0.05 a 0.1 mg/l en 5 días a 20°C. Incúbese un frasco de DBO lleno de agua de dilución durante 5 días a 20°C. La captación de OD en 5 días a 20°C no debería ser mayor a 0.2 mg/l y preferiblemente no mayor a 0.1 mg/l.

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