ELECTROFORESI HORITZONTAL EN GEL D’AGAROSA

ELECTROFORESI HORITZONTAL EN GEL D’AGAROSA

Objectiu: Separar molècules a partir del seu tamany i càrrega eléctrica a través d’una matriu am gel d’agarosa.

QÜESTIONARI

1. Dibuixa o fotografia tot el procediment, així com el resultat final del corriment i presenta-ho en forma de disseny gràfic.

Preparació gel agarosa

Resultat final

1. Quin creus que ha pogut ser el motiu pel qual no t’ha sortit prou bé el resultat?

Mala preparació del gel d’agarosa, o errors en omplir els pouets, ja sigui fen malbé aquests mateixos, o omplir amb una quantitat incorrecta.

2. De quin sospitós és la mostra de l’escena del crim? Hi ha alguna altra observació curiosa en el resultat?

La mostra de l’escena del crim és del sospitós número 2. Una altraobservació important és la semblança de colors entre els sospitosos 1 i 3. curiositat és que els altres dos sospitosos, nº 1 i nº3, tenen un color blau molt semblant entre ells.

ELECTROFORESI HORITZONTAL EN GEL D’AGAROSA (PRÀCTICA TEÒRICA)

QÜESTIONARI

1. a)Explica el principi en el que es basa la separació de molècules usant electroforesi en gels d’agarosa.

Amb l’aplicació d’un camp elèctric, les molècules de les proteïnes i ADN carregades electricament, pasen a través del gel d’agarosa i es separen.

b)Per quin tipus de biomolècules s’utilitza?

ADN, ARN i proteïnes.

2. Quins factors afecten a la mobilitat de les molècules en els gels?

El pH de la solució, la mida de les molècules, la porositat del gel i la intensitat del camp elèctric.

3. Explica com la càrrega de les molècules afecta a la migració d’elles.

Les molècules es mouran segons la seva càrrega dins del camp elèctric. Les molècules amb càrrega negativa, es desplaçaran cap al pol positiu, i les de càrrega positiva cap al pol negatiu.

4. Quina conclusió pots treure a partir dels resultats obtinguts amb la mostra F?

Doncs que a part de proteïnes i ADN o ARN, hi ha molècules de càrrega positiva.

5. Per què porten glicerol les mostres (s’afegeix en la seva preparació) que es dipositen en els pouets del gel?

Perquè la densitat del compost augmenti, i així evitar, possibles fugues dels pouets.

6.a) Què passaria si la solució tampó fos substituïda per agua destil•lada, ja sigui en la solució usada per a emplenar la càmera d’electroforesi o en la solució usada per a preparar el gel?

La conductivitat disminuira molt, i la circulació de les molècules càrregades seria més lenta i díficl.

b) Com ho solucionaries ?

Afegint sal comuna, i així augmentant la conductivitat de l’aigua.

7. a) Quines mostres tenen la mateixa càrrega,

...