Estudio de algunos factores que afectan el establecimiento de un método espectrofotométrico
Enviado por Dirafpsy • 27 de Octubre de 2015 • Informes • 2.322 Palabras (10 Páginas) • 1.189 Visitas
Instituto Politécnico Nacional[pic 1][pic 2]
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Métodos de Análisis
Estudio de Algunos Factores que Afectan el Establecimiento de un Método Espectrofotométrico.
Grupo: 4IV1
Profesor: Víctor Manuel L. Macías Martínez
Sección: 3
Alumno: Alanís Ortiz Diraf Naresh
FUNDAMENTO:
Generalmente, los espectros UV-visible muestran algunas bandas anchas. Comparada con técnicas como infrarrojo, que produce muchas bandas estrechas, la espectroscopía UV-visible proporciona información cualitativa limitada. La mayor parte de la absorción de los compuestos orgánicos resulta de la presencia de enlaces insaturados. Un cromóforo es un grupo molecular que, normalmente, contiene un enlace insaturado.
La presencia de una banda de absorbancia a una determinada longitud de onda es una buena indicación de la presencia de un cromóforo. Sin embargo, la posición del máximo no es fija sino que depende, en parte, del entorno molecular del cromóforo y del disolvente en el que pueda disolverse la muestra. Otros parámetros, como pH y temperatura, también pueden causar cambios tanto en la intensidad como en la longitud de onda de los máximos de absorbancia. Conjugando el doble enlace con otros dobles enlaces, aumenta tanto la intensidad como la longitud de onda de las bandas de absorción. Los iones de los metales de transición también tienen niveles de energía electrónica que causan absorción de 400–700 nm en la región visible.[pic 3]
El color es una propiedad importante de una sustancia. El color de la materia está relacionado con su absortividad o reflexividad. El ojo humano ve el color complementario al que se absorbe En la práctica, tanto la generación como la sensación de color son muy complejas y dependen de muchos factores, como el espectro del iluminante y, en el caso de sólidos, de la estructura de la superficie.
OBJETIVOS:
Determinar las condiciones que afectan un método espectrofotométrico y observar cómo influyen en la aplicación del método.
- Seleccionar tubos de ensayo con el mismo grosor y superficies homogéneas para usarlos como celdas.
- Mediante el método de Ringbom determinar el error fotométrico.
- Encontrar la concentración mínima detectable en la reacción.
RESULTADOS:
SELECCIÓN DE TUBOS.
SELECCIÓN DE TUBOS COMÚNES PARA SER USADOS COMO CELDAS
Tubo No. | %T400 (H2O) | Tubo No. | %T400 (H2O) | Tubo No. | %T400 (NiSO4) | Tubo No. | %T400 (NiSO4) |
1 | 95 | 11 | 96.2 | 1 | 22.5 | 11 | 23.1 |
2 | 96 | 12 | 94.7 | 2 | 23.7 | 12 | 21.8 |
3 | 94.2 | 13 | 95.4 | 3 | 23.9 | 13 | 23.2 |
4 | 94.4 | 14 | 95.9 | 4 | 23.8 | 14 | 22.8 |
5 | 95.5 | 15 | 93.2 | 5 | 23 | 15 | 22.8 |
6 | 96.6 | 16 | 96.1 | 6 | 23.6 | 16 | 22.9 |
7 | 96.1 | 17 | 95.1 | 7 | 23.6 | 17 | 22.5 |
8 | 96.7 | 18 | 93.3 | 8 | 23 | 18 | 23.5 |
9 | 94.8 | 19 | 95.9 | 9 | 22.7 | 19 | 23 |
10 | 95.6 | 20 | 96.5 | 10 | 23 | 20 | 23.2 |
Cuando se coloca en el haz, una cubeta se transforma en un componente óptico activo. Superficies ópticas no planas o no paralelas pueden desviar el haz y causar errores de absorbancia.
Las cubetas deben tener superficies ópticas muy planas y paralelas sin imperfecciones y con diámetro interno equivalente que permita que la luz atraviese la misma distancia en toda la celda. El grado de error depende de la geometría óptica del área de muestra.
CURVA DE CALIBRACIÓN.
Mediante los volúmenes medidos en la preparación de la curva se puede determinar la cantidad de iones Fe3+ añadidos a cada tubo.
C1*V1 = C2*V2 C2 = 0.00025M (0.05 mL) / 1000 mL C2 = 1.28x10-8M (55.845g/mol)
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