Examen Bioquimica
Enviado por Matías Matías • 17 de Enero de 2022 • Exámen • 1.238 Palabras (5 Páginas) • 47 Visitas
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Evaluación I(IIQ-356)
Nombre: Matías Mauricio Pérez González
Carrera: Ingeniería civil química
ITEM I. Se ha determinado la velocidad inicial de una reacción catalizada por una enzima para diversas concentraciones de sustrato. Los datos obtenidos son los siguientes:
[S] (mmol/L) | V (mmol/L)min-1 |
1.25 | 1.72 |
1.67 | 2.04 |
2.50 | 2.63 |
5.00 | 3.33 |
10.00 | 4.17 |
- Demuestre que la enzima sigue la cinética de Michaelis-Menten. (1 PTO)
Con el siguiente grafico podemos observar que se cumple la cinética de Michaelis-Menten
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- Calcule Vmáx, Km y afinidad con el método de Lineweaver-Burk. (1 PTO)
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Fórmula utilizada:
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- Calcule Vmáx, Km y afinidad con el método de Eadie-Hofstee y con el método de Hanes. (1 PTO)
Método Eadie-Hofstee: La pendiente es = -Km y la Vmax = Interseccion con eje Y
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Método Hanes: Pendiente = 1/Vmax, intersección = Km/Vmax.
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- Realice una conclusión integrando los 3 métodos gráficos lineales basándose en sus datos y lo que dice la literatura. (1 PTO)
En conclusión, los tres métodos empleados arrojaron resultados muy similares, sin embargo, el método Eadie-Hofstee entrega los datos de una manera más directa, por lo que resulta más viable de utilizar.
ITEM II. Se estudia la cinética de una determinada enzima, a continuación se detalla los valores de concentración y velocidades iniciales.
[S] սmol/L = 5, 10, 20, 50, 100 y 200.
V (սmol/L)/min = 22, 39, 65, 102, 120 y 135.
- Calcule la Vmáx, Km y afinidad con el método de Eadie-Hofstee. (1 PTO)
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- Si la concentración total de la enzima fuera de 1 nmol/L, ¿Cuántas moléculas de sustrato puede procesar una molécula de enzima en cada segundo (K2)? (1 PTO)
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- Calcule el Kobs (M-1 s-1). Use los parámetros cinéticos de Eadie-Hofstee (1 PTO)
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ITEM III. Se estudia la cinética de una enzima en ausencia y en presencia de un inhibidor. La velocidad inicial viene dada en función de la concentración de sustrato como en la siguiente tabla:
[S] mmol/L | Sin inhibidor (mmol/L)min-1 | Con inhibidor A (mmol/L)min-1 | Con inhibidor B (mmol/L)min-1 |
1.25 | 1.72 | 0.98 | 1.25 |
1.67 | 2.04 | 1.17 | 1.54 |
2.5 | 2.63 | 1.47 | 2.00 |
5.00 | 3.33 | 1.96 | 2.86 |
10.00 | 4.17 | 2.38 | 3.7 |
- Demuestre que tipo de inhibición se produce con el inhibidor A y con el inhibidor B utilizando solamente métodos gráficos. (2 PTO)
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Primero se realizó la gráfica de cinética de Michaelis-Menten para ver el comportamiento de la enzima con y sin inhibidor, luego se realizó el grafico de Lineweaver-Burk.
Con el grafico de Lineweaver-Burk se puede observar que las rectas de la enzima sin inhibidor y la enzima con inhibidor B tienen una intersección bastante cercana, esto quiere decir que la enzima con el inhibidor B es un inhibidor competitivo. La enzima con inhibidor A y la enzima sin inhibidor no intersecan, quiere decir que la enzima con inhibidor A es no-competitiva.
- Demuestre que tipo de inhibición se produce con el inhibidor A y con el inhibidor B haciendo cálculos de los parámetros cinéticos Km y Vmáx (2 PTO)
Utilizando el método de Lineweaver-Burk se obtuvieron los siguientes resultados:
Unidad Vmax: (mmol/L)min-1
Unidad Km: mmol/L
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