Fagocitosis Levaduras Opsonizadas NAT

Pocos segundos después del contacto de las celulas fagociticas con agentes quimiotácticos y con microorganismos, se detectan en las celulas alteraciones metabólicas que incluyen cambios en el potencial eléctrico de la membrana, producción y liberación de cAMP, liberación del anión superóxido y liberación de enzimas lisosomales. Dentro de los cambios oxidativos que acompañan al proceso de la endocitosis se encuentran los incrementos en:

a) Consumo de oxígeno

b) Consumo de glucosa

c) Actividad del ciclo de las pentosas o hexosas monofosfato

d) Producción de peróxido de hidrógeno y otros peróxidos

1. Reconocimiento

 En levaduras opsonizadas.

Previamente estas levaduras se pusierón con suero inmunológico, los Ac’s del suero las reconocierón como Ag’s y se acoplarón a ellas (fueron opsonizadas). En la práctica se desfibrino la sangre recientemente obtenida y quedo libre de anticuerpos. Entonces, al ponerse en contacto con las levaduras opsonizas estas van a ser activadoras de la vía alterna del complemento, por que el zimosan de Saccharomyces cerevisiae es un activador de ella. No puede ser vía de la lectina porque la fagocitosis no se estaba dando en un estado de infección aguda, ni via clasica porque no había presencia de Ac’s.

La ventaja de ingestión de levaduras se dio porque al estar opsonizadas, los neutrofilos tienen en su membrana los receptores para la fracción de complemento acoplada a levadura (C3b) CD35 además de los TLR’s (Receptores tipo toll), teniendo dos receptores para Ag en lugar de uno solo.

 En levaduras no opsonizadas.

Al quedar sin Ac’s acoplados a sus membranas aquí la fagocitosis no se vio más favorecida, pues el reconocimiento de ellas solo estuvo determinado por los TLR’s.

3. Identificación

Pinocitosis del Nitroazul de Tetrazolio

Esta ocurre despues de la ingestión de las levaduras, al estar compitiendo el NAT con el O2 por ser reducidos por la NADPH oxidasa, el NAT que esta siendo interiorizado al citoplasma del neutrofilo se encuentra de forma insoluble y azul. Entonces, en el citolplasma del neutrofilo se encuentran tanto el NAT como las levaduras ingestadas, lo que lleva a Saccharomyces cerevisiae a pinocitar al NAT.

Reducción del Nitroazul de Tetrazolio

Durante la fagocitosis tambien se observa un incremento en la capacidad de las celulas fagociticas para reducir el NBT. Su reducción ocurre cuando, compitiendo con el oxigeno, la molecula es reducida por la NADPH-oxidasa hasta su estado de formazan (producto insoluble de color azul). La reducción también se puede dar por efecto directo del anión superóxido.

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