INFORME DE LABORATORIO PROTEINAS

OBJETIVOS:

 Llevar a cabo algunas reacciones que permiten a través de una coloración especifica el reconocimiento de algunos aminoácidos

 Reconocer mediante reacciones de precipitación la desnaturalización de proteínas

DATOS:

1. Reacción xantoproteica

COMPUESTO PRUEBA XANTOPROTEICA REACCION OBSERVACIONES

Albúmina Positiva Después de calentarse Se presentó coloración amarillo claro

2. Reacción de ninhidrina

COMPUESTO PRUEBA DE NINHIDRINA REACCION OBSERVACIONES

Albúmina Positiva Después de calentarse Se presentó coloración violeta

Alanina Negativa No, incluso después de calor No hubo reacción

3. Prueba de Biuret

COMPUESTO PRUEBA DE BIURET REACCION OBSERVACIONES

Albúmina Positiva Después de calentarse No se presentó cambio de coloración, pero la mezcla se tornó lechosa

Alanina Positiva Después de calentarse Coloración azul oscuro

4. Coagulación por calor

COMPUESTO PRUEBA DE COAGULACION POR CALOR REACCION OBSERVACIONES

Albúmina Positiva Después de calentarse Se presentó un precipitado blanco(se coaguló)

5. Precipitación por ácidos minerales fuertes

COMPUESTO PRUEBA ACIDOS FUERTES REACCION OBSERVACIONES

Albúmina Positiva Después de calentarse La muestra se separó en dos fases, la albúmina se coaguló

ANALISIS DE LOS RESULTADOS:

1. Reacción xantoproteica

Al poner a reaccionar la albúmina con ácido nítrico (HNO3), y después de ser sometido a calor, la muestra se tornó de un color amarillo pálido, Esto se debe a la formación de un compuesto aromático nitrado, por medio de una sustitución nucleofilica. El resultado nos indica que hay presencia, en la proteína (Albúmina de huevo), de aminoácidos portadores de anillos aromáticos

2. Reacción de ninhidrina

Al agregarle ninhidrina a la albúmina y después de calentarla esta adquirió un tono violeta. En el caso de la alanina no se produjo reacción.

Cuando la ninhidrina reacciona con un aminoácido, la cadena lateral se pierde en forma de aldehído, produciendo un tinte color violeta-púrpura, entre mas intenso sea el color mayor es la concentración de aminoácidos.

La prueba de ninhidrina se utiliza para detectar y cuantificar la cantidad de aminoácidos libres.

3. Prueba de Biuret

Al agregarle reactivo de Biuret a la albúmina de huevo y después de calentar, la muestra adquirió un color azul oscuro. En el caso de la alanina, la muestra de color azul clara (debido al reactivo de Biuret) no presentó cambios en su coloración, pero si en su estado físico ya que se tornó lechosa y se empezó a coagular, posiblemente debido al calor.

La prueba de Biuret es positiva cuando están presentes dos o mas enlaces peptídicos y solo se da en péptidos y proteínas, no en aminoácidos, debido a que en estos últimos no hay presencia de enlaces peptídicos (-CO-NH-).

4. Coagulación por calor

Al someter a calor la muestra de albúmina, se formó un precipitado blanco en el tubo de ensayo, se presentó una coagulación de la proteína.

Esta reacción se debe al cambio de ambiente (calor), al que fue sometida la proteína, produciendo un cambio químico que condujo a una desnaturalización o perdida de su estructura normal.

En el caso de la albúmina, al calentarse esta se desenrolla y se coagula para formar una masa sólida elástica e insoluble en agua

5. Precipitación por ácidos minerales fuertes

Al agregar HCl a la albúmina esta

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