Identificación De Hongos

Micología

Medicina ilustrada

Roberto arenas

Mc Graw hill

Pagina 52

Identificación de los hongos

Al obtener el cultivo de un hongo se deben estudiar sus características macroscópicas, microscópicas y fisiológicas para definir el genero y la especie.

Las características varian con e medio de cultivo la naturaleza de los azucares, la pureza de la peptona, el pH, grado de humedad y temperatura. Por eso es preferible utilizar siempre medio glucosado de Sabouraud para estudiar y comparar características estándar en las mismas condiciones de humedad y temperatura, evitando contaminaciones.

Morfología macroscópica

Se deben estudiar las características siguientes

• Forma y tamaño

• Color en la superficie

• Difusión del pigmento

• Coloración: banca, rosada, gris, anaranjada, verde, rojiza, negra.

• Textura: yesosa, galabra, terrosa, granulosa, vellosa, lanosa, cerea, cremosa.

• Superficie: elevada, o plana, levantamiento central.

• Aspecto: plegado, radiado, cerebriforme, cracteriforme

• Consistencia: dura, suave, firme, membranosa.

• Rapidez de crecimiento: por ejemplo las levaduras y los oportunistas crecen en 24 a 48 horas y los dermatofitos en cinco a diez días.

Morfología microscópica

Pueden utilizarse los métodos siguientes:

1. Examen a través del tubo. Se utiliza la lupa del microscopio, se observa el borde de crecimiento. Es un método poco preciso pero rápido.

2. Examen de un fragmentó del cultivo. Consiste en tomar un fragmento de la colonia, dilacerarlo y observarlo con azul de lactofenol. Es el método habitual pero puede destruir los aparatos esporiferos y dificultar la identificación.

3. Metdo de la cinta adhesiva transparente (Rush- Munro). Es una varinete de la técnica anterior y permite observar las estructuras fungicicas casi sin alteración. Se recorta un pequeño cuadrado de cinta y se adhiere a la parte terminal del asa de platino, se aplica la parte adhesiva sobre la colonia y luego se coloca sobre un portaobjetos con una gota de colorante, se retira el asa, se añade otra gota de colorante, se pone un cubreobjetos y se observa al microscopio.

4. Cultivo en lamina o microcultivo. Es el mas preciso y permite observar las estructuras fúngicas in situ. Consiste en obtener un cultivo sobre un portaobjeto y observar el hongo sin deterioro de su morfología.

En el estudio de los órganos fúngicos se deben estudiar:

a) talo: filamentos o levaduras; grosor; bifurcaciones; presencia o ausencia de septos (micelio tabicado o cenocítico); color.

b) Esporas asexuadas y aparato conidiógeno.

c) Esporas sexuadas y estructuras donde se forman.

d) Cualquier formación anexa ( ornamenrciones)

Este estudio puede facilitarse utilizando contraste de fase.

Preservación y mantenimiento de los cultivos

Los laboratorios de enseñanza e investigación deben de mantener una colección (stock) para disponer en el futuro de colonias típicas y atípicas de los hongos patógenos. Así como de los oportunistas. El objetivo de mantenerlos es preservar su viabilidad, sin degeneración, variación o mutación.

Se pueden mantener en agar, transfiriendo periódicamente a medios frescos inclinados. Para hongos filamentosos se puede utilizar Sabouraud simple, agar papa, extracto de malta, harina de maíz (corn meal) y para levaduras, Sabouraud y extracto de malta preferentemente; para fase de levaduriforme de hongos dimorfos se puede utilizar infusión de cerebro- corazón.

El método de agua destilad sirve para preservar mas de un año y hasta en 10 años se obtienen esporas fértiles,

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