La función que cumple el etanol es la de separar el ADN de otras biomoleculas mediante la precipitación de este.
rjarabaInforme29 de Marzo de 2016
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EXTRACCION DE ADN
Cuestionario.
- ¿Qué función cumple el SDS o detergente liquido?
La función del SDS es la de desnaturalizar las proteínas circundantes del ADN de la muestra.
- ¿Qué función cumple el etanol?
La función que cumple el etanol es la de separar el ADN de otras biomoleculas mediante la precipitación de este.
- ¿Para qué se usa la arena?
La arena se usa para ayudar a triturar mejor el hígado.
- ¿Mencione otros métodos para precipitar los ácidos nucleicos?
Un método que se puede utilizar para precipitar los ácidos nucleicos es la electroforesis, en la que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
Otro método es el DNeasy Tissue Kit, el cual usa tecnología avanzada de membranas de silicato para purificar rápidamente ADN celular total sin usar extracciones orgánicas ni precipitación con etanol.
En general, existen una gran cantidad de métodos para la precipitación de ADN pero muchísimos de estos se basan en la y características de geles.
- ¿Cómo se identifican los ácidos nucleicos en el laboratorio?
Los ácidos nucleicos se pueden identificar en el laboratorio mediante electroforesis, ya que esta sirve para separar, identificar y purificar fragmentos de ADN.
- ¿Qué función cumple el NaCl?
El NaCl cumple la función de medio hipotónico causándole a la célula plasmólisis, es decir, ruptura de su membrana plasmática.
PROCEDIMIENTO
Para la realización de esta prueba, primero se tomó una pequeña cantidad de hígado (de res) para posteriormente ser triturado en un mortero de porcelana; luego, a este pedazo de hígado se le añadió una pequeña cantidad de arena para que al triturarse el hígado, se puedan romper las membranas y así queden los núcleos sueltos; después, de que el hígado se trituró por completo, se le adicionó 50 cm3 de agua destilada y se dejó de triturar, es decir, se removió cuando se formó una especie de papilla o puré.
Posterior a esto, el contenido que se encontraba en el mortero de porcelana, se dispuso a ser filtrado varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper; con el fin de separar el liquido de la masa del hígado. Luego que se hizo todo esto, se tomó el filtrado que se encontraba en el Beaker y éste se adicionó en una probeta, en el cual se obtuvo un volumen de 5 mL, a continuación, al filtrado se le adicionó su mismo volumen (5 mL) de Cloruro Sódico 2M con 1 cm3 de SDS y esto se dejó reposar por un tiempo no mayor a 5 minutos.
Mas tarde, cuando pasaron los 5 minutos, se adicionó 50 cm3 de alcohol (Etanol) al 96% y con una pipeta se empezó a adicionar poco a poco estos 50 cm3 de etanol por las paredes del Beaker en donde se encuentra depositado el filtrado y después que se adicionaron los 50 cm3 de etanol, se notó que el filtrado quedó en el fondo y el etanol en la parte superior del Beaker.
Por ultimo, se introdujo una varilla de vidrio en la mezcla del Beaker con el fin de remover una de las fibras blancas de ADN que se formaron en dicha mezcla.
RESULTADOS EXPERIMENTALES
Instrumento | ¿Qué se le adicionó? | ¿Qué se le adicionó a esto luego que se trituró? | ¿Qué le sucedió al hígado después que se dejó de triturar? | ¿Sobre qué se filtró el contenido del Beaker? | ¿Con qué fin se filtró el contenido del Beaker? | ¿Qué fue lo que se obtuvo luego del filtrado? | ¿De qué color quedó el filtrado? | ¿Qué fue lo que se hizo después de todo esto? | ¿Cuál fue el volumen que alcanzó el filtrado en la probeta? | ¿Qué reactivos se le adicionaron a este filtrado? | ¿Por cuánto tiempo se dejó reposar? | ¿Con qué fin se dejó en reposo el contenido de la probeta? | ¿Qué se le adicionó luego de que pasaran los 5 minutos de reposo? | Resultado obtenido |
Beaker | Hígado triturado | 50 cm3 de agua destilada y a partir de aquí se dejó de triturar el hígado | Se convirtió en una especie de papilla o puré | Se filtró varias veces sobre una tela | Con el fin de separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper | Se obtuvo que en la tela quedó la masa del hígado y en el Beaker quedó un liquido un poco espeso | El filtrado quedó con un tono de color café | El filtrado que se encontraba en el Beaker se adicionó en una probeta | El filtrado alcanzó un volumen de 5 mL | 5 mL de cloruro sódico 2M con 1 cm3 de SDS | Por un tiempo no mayor a 5 minutos | Con el fin de conseguir producir el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina | Luego de pasaran los 5 minutos de reposo, el contenido de la probeta se adicionó en un Beaker y con una pipeta se le adicionó poco a poco 50 cm3 de alcohol (Etanol) por las paredes del Beaker | Se notó que el filtrado quedó en el fondo y el alcohol quedó en la parte superior del Beaker (no se mezclaron), en el cual se notó además que en el filtrado se formaron unas pequeñas fibras blancas las cuales son la agrupación de muchas fibras de ADN |
REDACCION: Los resultados de la tabla anterior demuestran que,
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