Laboratorio de Bioquímica General Reacciones Enzimáticas de Oxido Reducción
Enviado por Abril1094 • 8 de Abril de 2018 • Informes • 832 Palabras (4 Páginas) • 408 Visitas
Instituto Politécnico Nacional [pic 1][pic 2]
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Departamento de Bioquímica
Laboratorio de Bioquímica General
Reacciones Enzimáticas de Oxido Reducción
Sección: 3 Integrantes: XX
Objetivos.
1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
No contenía agua | No contenía el cofactor NAD+ | Sin presencia de sustrato (Lactato) | Sin presencia de la Enzima (Extracto) | Sin KCN Que fomentaba la formación de Lactato |
- Determinar la activad de algunas enzimas que participan en reacciones de óxido-reducción y discutir la importancia de los cofactores y el efecto de algunos inhibidores
- Comparar el tiempo de reacción entre los tubos de LDH de hígado y musculo.
- Observar la reacción a partir del lactato.
Resultados.
Tabla 1.1 Determinación de la actividad de la deshidrogenasa láctica (LDH) en musculo.
Tubo | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Observación inicial | S/C | S/C | S/C | S/C | S/C |
2 min | + | S/C | + | S/C | S/C |
5 min | +++ | + | ++ | S/C | S/C |
7 min | ++++ | + | +++ | S/C | S/C |
10 min | ++++ | ++ | ++++ | S/C | S/C |
15 min | +++++ | +++ | ++++ | S/C | S/C |
30 min | +++++ | ++++ | +++++ | S/C | S/C |
+++++: Estado totalmente reducido, S/C: sin cambios
Tabla 1.2 Determinación de la actividad de la deshidrogenasa láctica (LDH) en higado.
Tabla 1.3 Características de cada tubo.
[pic 3]
Imagen 1.1 Reacción de la enzima deshidrogenasa láctica (LDH)
[pic 4]
Imagen 1.2 Serie de Reacciones en la cual el Azul de metileno es el último aceptor de electrones.
Lactato NADH2 Azul de Metileno Reducido[pic 5][pic 6][pic 7][pic 8]
LDH
Piruvato NAD+ Azul de Metileno Oxidado
Tubo | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Observación inicial | +++ | + | S/C | S/C | S/C |
2 min | +++++ | ++ | + | S/C | ++ |
5 min | +++++ | ++ | ++ | S/C | ++++ |
7 min | +++++ | +++ | +++ | S/C | +++++ |
10 min | +++++ | +++++ | +++ | S/C | +++++ |
15 min | +++++ | +++++ | +++++ | S/C | +++++ |
30 min | +++++ | +++++ | +++++ | S/C | +++++ |
tubo | Resultado |
1 | La reacción se llevó a cabo como se esperaba, ya que La deshidrogenasa láctica (DHL) cataliza la conversión del piruvato a lactato y viceversa, haciéndose notoria con la reducción del azul de metileno. |
2 | La reacción no se lleva acabo adecuadamente debido a la ausencia de Coenzima NAD+ por lo cual no se observa al instante cambios de color del azul de metileno. |
3 | La reacción se lleva a cabo de manera lenta debido a que a pesar de que no hay sustrato, la enzima es capaz de utilizar lo que encuentra en el medio o en el mismo extracto de hígado o musculo para realizar sus procesos de catálisis. |
4 | La reacción no puede llevarse a cabo debido a que no hay enzima que pueda realizar la catálisis por lo cual no se observa cambios de color del azul de metileno. |
5 | La reacción se lleva a cabo haciéndose notoria la reducción del azul de metileno. Ya que sigue habiendo los sustratos para poder realizar la reacción. |
...