Microscopía

MICROSCOPIA

INTRODUCCIÓN

Existen diversos métodos de estudio de la célula y de los tejidos, el principal instrumento para investigar estas estructuras es el microscopio; existen así diferentes tipos, dependiendo de la estructura y tamaño de las muestras.

Los microscopios más importantes son el óptico y el electrónico, cada uno de estos tienen sus extensiones correspondientes como por ejemplo:

Microscopia óptica - de contraste

- de fase

- de interferencia

- entre otros.

Microscopia electrónica - de transmisión

- de alta aceleración

- de barrido

Ambos instrumentos tienen que utilizar diversas técnicas preparatorias, cada una dependiendo del microscopio, estas técnicas son:

a) fijación

b) inclusión

c) corte

d) tinción

cada técnica la conoceremos en profundidad en el proceso de observación de tejido de este informe, donde veras gracias a estas técnicas preparatorias cada estructura muy bien definida, gracias al tipo de tinción.

Gracias a este tipo de instrumentos y sus diversas especialidades podremos ver y estudiar con mayor facilidad las células y tejidos.

Objetivos

conocer los diferentes tipos de microscopios

Comprender las funciones de los microscopios electrónico y óptico; y conocer sus partes.

Comprender la utilidad de cada microscopio

Comprender el manejo del microscopio óptico

Conocer y aprender a observar una muestra cualquiera en el microscopio óptico

Llevar a la practica las diferentes precauciones dadas

Aprender sobre las tinciones

MARCO TEORICO

Existen muchos tipos de microscopios cada uno desarrollado con cualidades distintas par la observación de diferentes estructuras, algunos de ellos son:

Microscopio óptico

Microscopio de campo oscuro

Microscopio de fluorescencia

Microscopio de túnel de barrido

Microscopio de ultravioleta

Microscopio de polarización

Microscopio de contraste de fase

Microscopio electrónico de barrido

Microscopio digital

Microscopio cuántico

MICROSCOPIO ÓPTICO

El microscopio óptico se compone por parte mecánica y óptica. Los componentes ópticos constan de tres sistemas de lentes.

1.- El condensador ilumina el objetivo estudiado.

2.- El objetivo aumenta el objeto y hace que la imagen se vea en el ocular.

3.- El ocular incrementa aún más la imagen y la proyecta sobre la retina del ojo.

Cabe destacar que este microscopio tiene un alto poder de resolución.

Existe método para la preparación de muestras utilizadas en el microscopio óptico, los pasos son:

1.- Fijación: en este proceso la descomposición de la célula muerta, y se mantiene su estructura morfológica. Los líquidos fijadores utilizados son el alcohol, el acido acetilico y el formaldehído o formol.

2.- Inclusión y corte: como el material resultante de la fijación es muy blando para poder cortarlo, se procede a endurecer el material en una sustancia plástica que generalmente es parafina o resina, quedando apto para que se realice el corte con un instrumento llamado micrótomo.

3.- Tinción: este método es utilizado para colorear artificialmente las estructuras celulares.

MICROSCOPIO ELECTÓNICO

Esta construido por un cañón de electrones y un conjunto de lentes magnéticos que están dentro de una columna hecha al vació para evitar que los electrones se dispersen. El haz o flujo de electrones pasa a través de una muestra muy delgada y luego es enfocada para ampliar la imagen.

Para la preparación de muestras utilizadas en el microscopio electrónico se emplean técnicas similares a las del microscopio óptico.

1.- Fijación: consiste en ocupar glutaraldehido en vez de formol, ya que consigue una mejor preservación de los tejidos, luego se aplica osmio el que permite que se produzca un contraste en la muestra al chocar los electrones.

2.- Inclusión: se realiza en resinas plásticas, que proporciona una mayor dureza.

3.- corte: se utiliza un instrumento llamado ultramicrotomo que realiza cortes extremadamente finos, este instrumento utiliza cuchillos especiales muy afilados que pueden ser vidrio o diamantes.

4.- Contraste: como no se utiliza colorante o tintas aquí se emplean átomos de metales pesados, como el plomo y el uranio que acentúan el contraste proporcionado por el osmio.

MATERIALES Y METODOS

Los materiales que utilizamos en esta ocasión en el laboratorio de microscopia y en nuestra investigación fueron:

Microscopio óptico

Muestra de testículo de rana

Muestra de ovario de gata

Mielencéfalo de rata

Aceite de inmersión

Solución de alcohol

Paño par limpiar los objetivos

Métodos

conocer las partes del microscopio y la correcta manipulación de éste.

luego colocar las muestras en la platina del microscopio.

colocar la muestra con el mínimo de poder de resolución 4X.

observar detalladamente la muestra que se nos paso.

mientras observamos las muestras, dibujamos lo observado tratando de distinguir sus partes.

luego de terminar el dibujo cambiar de aumento esta ves a la resolución de 10X.

realizamos lo mismo que en el objetivo anterior, observar y dibujar.

aumentaremos la resolución esta ves a 40X, y realizaremos los mismo procedimiento que con las muestras anteriores.

finalmente aumentaremos la resolución a 100X, con este objetivo es necesario utilizar aceite de inmersión para poder tener una mejor visión de la muestra.

luego de terminar de ver la muestra se baja la platina se cambia los objetivos con el revolver asta el mínimo (4X) y se limpia el objetivo de 100X con una solución de alcohol para sacar los restos de aceite de inmersión.

- con las demás muestras se realizo lo ya antes nombrado.

Resultado y discusión

Esquema I-A

Objetivo : Observación de testículos de mamíferos

Material : Testículo de mamífero

Método : Mediato (ósea que se ocupa tinsión)

Tinción : Hematoxilina-eocina

Aumento : 4X

Observación: En la muestra se puede apreciar células, que podrían ser gónadas o células gameticas, que en su interior presentan un desmembramiento de la membrana interna, estas células se ven conectadas por un tejido conectivo.

Discusión: En el campo visual se denota muchas estructuras ovoides, que corresponden a los tubulos seminíferos, en su interior presentan unas pequeñas partículas que corresponden a las células espermatogenicas, las cuales se encuentran en mayor número hacia la periferia y en el centro casi nada, el poder de aumento solo permite ver esto.

Esquema II-A

Objetivo : Observación de testículos de mamíferos

Material : Testículo de mamífero

Método : Mediato (ósea que se ocupa tensión)

Tinción : Hematoxilina-eocina

Aumento : 10X

Observaciones: La figuras se ven mucho más grandes y se ven mejor las estructuras internas de la célula gametica, dentro de esta hay partículas que se tiñen mejor, que podrían ser los túbulo seminíferos, también se aprecia mejor el desprendimiento de partes de membrana que se encuentra mas particionado hacia el centro (se parece mucho a la figura de las crestas mitocondriales)

Discusión: Al tener mayor poder de aumento, se denota mejor las estructuras internas, se ven menos tubulos seminíferos pero ahora son mas grandes, también las células espermatogenicas se aprecian mucho mejor, se evidencia que hay unas mas grandes que otras, las mas grandes están en la periferia y en el centro hay algunas células pequeñas.

Esquema III-A

Objetivo : Observación de testículos de mamíferos

Material : Testículo de mamífero

Método : Mediato (ósea que se ocupa tensión)

Tinción : Hematoxilina-eocina

Aumento : 40X

Observaciones: Ahora se ve una sola célula, mas definida, donde se puede apreciar el desprendimiento de membrana y que junto a este desprendimiento hay muchas particulas que se encuentran mas teñidas que otras y encontrandose hacia hacia la periferia de la celula, donde estan en mayor numero y tamaño.

Discusión: Ahora solo se ve en el campo visual un solo túbulo seminífero y en su interior se puede apreciar claramente las distintas fases de desarrollo de las células espermatogenicas, en la periferia están los espermatogonios y en el centro algunos espermatocitos, también en algunas células espermatogónicas se ven unas manchas negras que deberían corresponder a las células de Sertoli.

Esquema IV-A

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