MICROSCOPIA

UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERIA EN ALIMENTOS

CARRERA DE BIOQUIMICA

Marzo-Agosto 2013

MARIA JOSÉ BARRENO

22 de marzo de 2013

MICROSCOPIA

OBJETIVO GENERAL

El objetivo de este ensayo es familiarizarse con el mundo de la microscopía, haciendo un breve recorrido por los orígenes históricos y evolución del microscopio, para luego centrarnos en su estudio describiendo sus partes, al igual que los tipos y principales funciones de los mismos y del mismo modo investigar sus nuevos avances tecnológicos.

INTRODUCCION

En su afán de llegan siempre más lejos en la investigación de la naturaleza de lo que los límites de sus órganos sensoriales le imponen, el hombre ha construido múltiples instrumentos que le han permitido acceder allí donde los sentidos no podían penetrar.

Así como el telescopio abrió a la humanidad las puertas de lo infinitamente grande, el microscopio hizo posible conocer los mundos de dimensiones ínfimas, entre ellos la célula, base de la vida. Se contaban así las bases de las modernas ciencias biológicas que hasta bien entrada la edad moderna se habían fundado en las observaciones directas.

Los microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formación de imágenes ópticas aumentadas a través de lentes convergentes, permiten la observación de pequeños detalles de una muestra dada que a simple vista no se percibirían.

HISTORIA DE LA MICROSCOPIA

Las fuentes históricas procedentes de civilizaciones antiguas como la asiria,la clásica o la árabe, nos hablan ya del poder amplificador de las lentes biconvexas yde la utilización de técnicas de ampliación de la imagen. El término microscopioderiva etimológicamente del griego mikrós (pequeño) y skoopéo (observar) y fueacuñado por Jean Faber en 1624. Sin embargo, el impulsor más significativo de lamicroscopa fue el holandés Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723). Anatomista yfisiólogo, Leeuwenhoek construyó sus propios microscopios con lentes convexasque él mismo pulía. Entre sus aportaciones más importantes está la de ser uno de losprimeros en estudiar la composición de la sangre y en observar y dibujar protozoos;en 1676 descubrió las bacterias.

Los primeros microscopios denominados simples constaban solamente deuna lente, la cual se sostenía con la mano y se dirigía hacia la fuente de luz para queésta atravesara la lente y el objeto. Estos microscopios producían, no obstante,difracciones y aberraciones, que se corrigieron gracias a la técnica del Doblete, aportada por Wollastone (1766-1826), aplicando al microscopio un ocular astronómico. A principios del siglo XVIII, el microscopio sufre sus modificaciones más importantes, no sólo en lo referente a óptica, sino también, en la mecánica. Enrelación a ésta última, cabe mencionar el de Hooke en 1667, con una bola de vidrioque condensaba los rayos luminosos; el microscopio de trípode de Von Asch (1687), el de columna de Bonnani (1691) y el de Joblot (1716) con cristal de campo. Una de las aportaciones más interesantes fue la de Cuff-Baker (1744) que confeccionó un aparato de columna con movimiento rápido y movimientomicrométrico y con un espejo fijo para concentrar la luz. Este sería el precedente delactual microscopio compuesto y producía defectos y aberraciones cromáticas y esféricas, a pesar de dar buenas ampliaciones, por lo que se regresó al estudio delmicroscopio simple, más sencillo que éste y más efectivo por aquel entonces.

El descubrimiento del microscopio compuesto es contemporáneo al de laslupas y se debe principalmente a Zacarias Janssen, su primer constructor (1590). Elgran paso en el perfeccionamiento de éste se debe a Dolland, que con su objetivoapocromático compuesto de dos lentes superpuestas, una convergente y otradivergente logró mejorar en gran medida las observaciones. A partir de entonces, laevolución del microscopio compuesto ha sido progresiva, destacando Alemania,Inglaterra y Francia como principales países impulsores. Así, hoy podemos hablar deavances tales como: la aplicación de la tecnología láser y de la informática a la microscopía.

DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO.

En este punto vamos a describir las partes de un microscopio atendiendo a las clasificaciones que tradicionalmente se han realizado, clasificaciones que distinguen dentro del microscopio una parte mecánica y una parte óptica. Es una clasificación bastante general ya que no incluimos en ella la gran cantidad de accesorios y suplementos que se pueden añadir o acoplar a un microscopio.

COMPONENTES MECÁNICOS DEL MICROSCOPIO.

El ESTATIVO O SOPORTE Está formado por un pie pesado que sostiene un brazo inclinado del cual salen tanto la platina como el tubo del microscopio.

La PLATINA es la pieza sobre la que se colocan las diferentes preparaciones que deseamos observar. La forma de la platina es variada y puede ser tanto fija como móvil. Prácticamente, todos los microscopios profesionales actuales poseen un carro móvil graduado, que hace posible el movimiento y la localización precisa de áreas de interés en la preparación.

El TUBO lleva, en la parte inferior, el revólver con los objetivos, y en la superior, los oculares cambiables.

El REVÓLVER es una pieza que lleva varios objetivos intercambiables y permite adaptar éstos al tubo del microscopio.

Los MANDOS DE ENFOQUE manejan el enfoque bien sea por el movimiento vertical de la platina o del tubo, según el tipo de microscopio. Habitualmente se colocan a ambos lados del estativo. Para una mayor precisión en el enfoque es necesario un mando micrométrico para ajuste fino, resultando más cómodos si ambos mandos (macro y micro) actúan sobre el mismo eje (co-axiales).Actualmente los microscopios profesionales llevan estos mandos graduados, así como control de tensión o pre enfoque rápido.

COMPONENTES ÓPTICOS DEL MICROSCOPIO

Los OBJETIVOS constan de un sistema de lentes. Podemos hablar de objetivos secos, que son aquellos en los que entre el objetivo y la preparación sólo hay aire, y también podemos hablar de objetivos de inmersión, cuando es necesario colocar entre la lente y la preparación un elemento líquido, que permite una mayor luminosidad. Ésta y otras características como: aumento del objetivo, apertura numérica, longitud del tubo y espesor del cubreobjetos, vienen indicadas mediante unas marcas en el objetivo.

Los OCULARES están formados por dos lentes que se encuentran separadas por un diafragma. Para hacer más cómoda la observación, existen microscopios que tienen dos oculares en lugar de uno. Ello permite observar con los dos ojos a la vez. Actualmente existen cabezales múltiples, que permiten que varias personas puedan observar una misma muestra a la vez.

La FUENTE DE LUZ es muy importante ya que una correcta iluminación de la preparación que deseamos observar es una condición necesaria para poder realizar una buena observación. Podemos obtener la fuente de luz a través de un espejo situado debajo de la platina, que recoge tanto la luz natural como la luz eléctrica, o a través de lámparas incorporadas al pie del microscopio.

El CONDENSADOR es una lente o sistema de lentes situadas debajo de la platina y que permite concentrar la luz en la muestra que se observa Existen distintos tipos de condensadores, dependiendo de las necesidades y requerimientos de nuestra observación: abbe, de campo oscuro, acromático, etc.

El DIAFRAGMA está situado debajo de la platina y del condensador, siendo el encargado de regular la entrada de luz al condensador. En algunos modelos se acciona por medio de una palanca y en otros mediante una rueda con orificios de distintos diámetros. Actualmente, las numerosas innovaciones tecnológicas en los campos de la informática y la electrónica han influido notablemente en el mundo de la microscopia. Ésta ha mejorado mucho con la utilización de nuevos accesorios como cámaras fotográficas, monitores, vídeos o vídeo-impresoras, que es necesario tener en cuenta a la hora de hablar de los componentes del microscopio.

TIPOS DE MICROSCOPIO Y FUNCIONES.

Hay varios tipos de microscopios disponibles en el mercado. Seleccionar un tipo adecuado no es una tarea simple, ya que tienes la necesidad de determinar para qué fin será utilizado exactamente. Abajo podrás ver los tipos de microscopios modernos.

MICROSCOPIA ÓPTICA:

M. Simple:

- Lupas: monoculares

- Lupas binoculares

M. Compuesto:

• Estereomicroscopios

• De luz ultravioleta

• De fluorescencia

• De contraste de fases

• De campo oscuro

• De polarización Estereomicroscopio

• Microscopia por luz reflejada

MICROSCOPIA ELECTRÓNICA:

• De Barrido (MEB)

• De Transmisión (TEM)

• Microscopio confocal de barrido láser Microscopio Clásico 7

MICROSCOPIO ÓPTICO (o de campo luminoso).

En estos tipos de microscopios, el área observada está ampliamente iluminada y los objetos que se estudian aparecen más oscuros que el fondo. Normalmente alcanzan hasta unos 1000 aumentos, aunque con oculares poderosos esta cifra puede llegar a incrementarse en dos veces. El límite útil de este aumento es de 2000 y la razón de este límite de amplificación, se debe al poder de resolución, entendido como la capacidad de distinguir dos puntos adyacentes como distintos y separados. Este poder de resolución se da en función de la longitud de onda de la luz utilizada y de la apertura numérica que posea el sistema de lentes empleado.

Así, puede afirmarse

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