Molecular

ESCUELA POLITÉCNICA DEL EJÉRCITO

DEPARATAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA

CARRERA DE INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA

MOLECULAR I

1. TEMA: Identificación del tamaño de las bandas de un gel.

2. OBJETIVOS:

• Conocer e identificar el tamaño de las bandas de un gel

3. INTRODUCCIÓN:

Electroforesis en gel. Se siembra la muestra (ADN, ARN o proteínas) en un gel que es sometido a una corriente eléctrica. Las moléculas se mueven a través del gel impulsadas por dicha corriente. Esta técnica permite separar moléculas de acuerdo a su tamaño y carga ya que las más pequeñas (o aquellas con mayor carga) se mueven con mayor velocidad. [Educar, (sin año)]

4. MARCO TEÓRICO:

La electroforesis en gel es uno de los métodos más utilizados para separar ácidos nucleicos o proteínas, de acuerdo con su tamaño. Esto se logra por la diferencia de desplazamiento de las moléculas a lo largo de un gel sometido a un campo eléctrico.

La velocidad de desplazamiento de las moléculas es inversamente proporcional a su tamaño. En los ácidos nucleicos la carga está dada por los nucleótidos, por lo que el tiempo que tardará la molécula en atravesar el gel será directamente proporcional al número de nucleótidos que tenga, es decir a su tamaño. De esta manera, para un tiempo determinado, las moléculas más grandes quedarán más retrasadas en el gel que las moléculas más pequeñas.

La separación de proteínas es un poco más complicada, ya que éstas poseen una estructura tridimensional compleja y compacta, además de una carga neta que depende de la identidad de los aminoácidos que la componen. Esto hace más difícil separarlas sólo por su tamaño y por eso se emplea una versión modificada conocida como electroforesis en gel de poliacrilamida. Las proteínas forman bandas de acuerdo con su tamaño; si se corre una muestra con proteínas de tamaño conocido se puede determinar el tamaño de la proteína estudiada por la distancia recorrida en el gel. Las proteínas más grandes quedarán arriba y las más chicas quedan abajo (y las de tamaño medio quedarán entre las demás). Además, el grosor de la banda obtenida dependerá de la cantidad de proteína que se haya sembrado; cuanto mayor sea la cantidad de proteínas, más gruesa será la banda. [Educar, (sin año)]

Figura 1. El gráfico muestra bandas de distinto ancho, correspondientes a distinta cantidad y tamaño de la muestra de proteínas.

El E-Gel ® 1 Kb Ladder Además ADN

El más popular y más fácil de usar escalera es el E-Gel ® 1 Kb DNA Ladder . Además, es comúnmente usado para estimar el tamaño de la doble hélice de ADN productos de la PCR. El E-Gel ® Ladder Rango Bajo cuantitativa del ADN es adecuada para la estimación de la cantidad y el tamaño (de 100 pb a 2 kb) del ADN de doble cadena. El E-Gel

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