Mínima de un entorno para el crecimiento de bacterias heterótrofas

1. Calentar agua en un recipiente

2. Añadir a éste el contenido del paquete y remover enérgicamente la composición, hasta que el soluto (los granos de gelatina) dejan de observarse y la disolución se vuelve homogénea.

3. Aun estando caliente la disolución se vierte en los recipientes donde se van a cultivar las bacterias (tantos como sean necesarios para el experimento, no olvidando el control: donde no se espera la aparición de ningún microorganismo).

4. Una vez preparados los recipientes hay que cerrarlos herméticamente (para evitar una posible contaminación), y meterlos en la nevara durante la noche, para que la gelatina solidifique.

Un ejemplo típico para entender las poblaciones microbianas es: tocar un plato (donde va a aparecer la microbiota de la superficie cutánea), esparcir una pequeña muestra de líquido de un rio, lago, o charco, y por ultimo coger una muestra de tierra mezclarla con agua y luego esparcirlo sobre el plato, y observar de esta forma el distinto fenotipo de las colonias bacterianas.

Sin embargo tiene un pequeño inconveniente las bacterias se entierran en el medio, y con el paso de los días dificulta su posterior manipulación. Por eso es recomendable seleccionar la colonia de interés y cultivarla en un nuevo plato, después de como mucho una semana.

http://doityourselfscience.wordpress.com/2011/04/11/como-preparar-un-medio-de-cultivo-casero/

Otros conceptos empleados en la construcción de medios de cultivo son los principios de selección y enriquecimiento. Un medio selectivo es aquel que tiene agregados componentes que inhibirán o prevendrán el crecimiento de ciertos tipos o especies de bacterias y/o promoverán el crecimiento de las especies deseadas. Uno puede también ajustar las condiciones físicas del medio de cultivo, como el pH y temperatura, para hacerlo selectivo para organismos capaces de crecer bajo esas condiciones.

Un medio de cultivo puede también ser un medio diferencial si permite al investigador distinguir entre diferentes tipos de bacterias basado en algún rasgo observable de su pauta de crecimiento en el medio.

Tabla 4a. Medio mínimo para el crecimiento de Bacillus megaterium. Un ejemplo de medio químicamente definido para el crecimiento de bacterias heterotróficas.

Componente Cantidad Función del componente

sucrose 10.0 g C y fuente de energía

K2HPO4 2.5 g buffer pH; fuente de P y K

KH2PO4 2.5 g buffer pH; fuente de P y K

(NH4)2HPO4 1.0 g buffer pH; fuente de N y P

MgSO4 7H2O 0.20 g fuente de S y Mg++

FeSO4 7H2O 0.01 g fuente de Fe++

MnSO4 H2O 0.007 g fuente de Mn++

agua 985 ml

pH 7.0

Tabla 4b. Medio definido (también medio enriquecido) para el crecimiento deThiobacillus thiooxidans, una bacteria litoautotrófica.

Componente Cantidad Función del componente

NH4Cl 0.52 g fuente de N

KH2PO4 0.28 g fuente de P y K

MgSO4 7H2O 0.25 g fuente de S y Mg++

CaCl2 2H2O 0.07 g fuente de Ca++

Azufre elemental 1.56 g fuente de energía

C02 5%* fuente

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