Objetivo: Que el alumno realice la técnica de diluciones seriadas y el método de siembra cuenta en placa, utilizando como muestra agua de botellón.

Practica 5

Cuenta en placa de bacterias mesófilas

Objetivo: Que el alumno realice la técnica de diluciones seriadas y el método de siembra cuenta en placa, utilizando como muestra agua de botellón.

Fundamentación: En la práctica se llevó a cabo el método de diluciones seriadas para reducir el número de organismos con cada dilución y ayudar a la distribución de los organismos presentes en la muestra. Para esto se utilizó la NOM-110-SSA1-1994.

Como método de siembra se utilizó la cuenta en placa usando como seguimiento la NOM-092-SSA1-1994. La técnica se basa en contar las “unidades formadoras de colonias” o UFC.

Como medio de cultivo se utilizó en agar nutritivo y se dejó incubar a una temperatura de 37.5° por 48 horas.

Introducción: Una dilución seriada es simplemente una serie de diluciones simples que amplifican el factor de dilución rápidamente, comenzando con una pequeña cantidad inicial de muestra (cultivo de bacterias, un reactivo químico, un jugo, etc.). La fuente del material para diluir en cada paso viene del material diluido en el tubo anterior. En una dilución seriada el factor de dilución total en cualquier punto es el producto del factor de dilución individual en cada uno de los tubos. 

La técnica de cuenta en placa se basa en contar las “unidades formadoras de colonias” o UFC presentes en un gramo o mililitro de muestra. Se considera que cada colonia que desarrolla en el medio de cultivo de elección después de un cierto tiempo de incubación a la temperatura adecuada, proviene de un microorganismo o de un agregado de ellos, de la muestra bajo estudio; ese microorganismo o microorganismos son capaces de formar la colonia, es decir una UFC. Para que las colonias puedan contarse de manera confiable, se hacen las diluciones decimales necesarias de la muestra, antes de ponerla en el medio de cultivo; la técnica para realizar este procedimiento se describe en “Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análsis microbiológico”.

Metodología:

[pic 1][pic 2][pic 3][pic 4][pic 5][pic 6][pic 7][pic 8][pic 9][pic 10][pic 11][pic 12][pic 13][pic 14][pic 15][pic 16][pic 17][pic 18][pic 19][pic 20][pic 21][pic 22][pic 23][pic 24][pic 25][pic 26][pic 27][pic 28][pic 29][pic 30][pic 31][pic 32][pic 33][pic 34][pic 35][pic 36][pic 37][pic 38][pic 39][pic 40][pic 41][pic 42][pic 43][pic 44][pic 45][pic 46][pic 47][pic 48][pic 49][pic 50][pic 51][pic 52][pic 53][pic 54][pic 55]

Diluciones seriadas según el seguimiento de la NOM-110-SSA1-1994 y vaciado en caja Petri según la NOM-092-SSA1-1994.

...