PRUEVAS PRESUNTIVAS Y CALIFICATIVAS DE COLIFORMES FECALES EN MUESTRAS LIQUIDAS

PRUEVAS PRESUNTIVAS Y CALIFICATIVAS DE COLIFORMES FECALES EN MUESTRAS LIQUIDAS.

OBJETIVO:

Identificar coliformes fecales en muestras liquidas.

INTRODUCCION.-

Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Si sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato qe se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no.

El grupo coliformes es un grupo de bacterias que presentan las siguientes características morfológicas y bioquímicas similares. Son bacilos Gram-negativo, no esporulados que fermentan la lactosa en un periodo de 48 horas a 35°C. El recuento de este grupo de bacterias suele hacerse en medio sólido (agar BRV) aunque un medio líquido a base de caldo lactosado (CL) y caldo bilis verde brillante (CBVB) puede ser utilizado como prueba alternativa para determinar el número más probable de coliformes (NMP) presentes en una muestra.

Como miembro de grupo de coliformes se incluyen los bacilos aerobios o anaerobios facultativos, no esporulados, Gram negativos que fermentan la lactosa con producción de gas en 48 horas a 35 °C. Las bacterias incluidas en esta definición serían: Echerichia coli, Aerobacter aerogenes y formas intermedias. Se considera que E. coli es habitante normal del intestino de animales de sangre caliente y que su presencia en una muestra de agua indicaría contaminación de origen fecal. En tanto que, Aerobacter aerogenes, es también habitantes del intestino pero es frecuente encontrarla en el suelo, vegetales y en el agua aún en casos en que es poco probable relacionar su presencia con contaminación con heces fecales. Algunos autores piensa que E. coli es verdadero coliforme fecal (1).

MATERIALES SUSTANCIAS

Cajas petri LB

Tubos de ensayo Bilis brillante

Pipetas Agua destilada

Gradilla

matraces

Mecheros

Campanas

METODOLOGIA:

1.- Primeramente se esterilizo el material

2.- En dos matraces de 250 ml se colocaron 100 ml de agua destilada para la preparación de los medios de cultivo. Bilis brillante y lb.

3.-Posteriormente se procedió a hacer el vaciado en medio de dos mecheros.

4.-Se vaciaron los medios en los tubos de ensayo 9 del bilis brillante y 9 del lb

5.-Del LB se se etiqetaron 3 como10-1, otros 3 como 10-2 y otros 3 como 10-1.

6.- En otro matraz con 89 ml de agua destilada se pusieron 11 ml de la muestra qe fue te d´kata.

7.- En cada tubo con LB se puso un ml de la muestra

8.-Se coloco una campana en cada tubo para observar los gases que había en esta bebida.

9.-Se dejo fermentar 72 hrs en la incubadora.

10.-de ahí se procedió a hacer una dilución del lb al bilis brillante.

11- de igual manera se tomo un ml con una pipeta de cada tubo con LB para ponerlo en los tubos con bilis brillante. Se colocaron en la gradilla y se pusieron a incubar.

RESULTADOS:

TUBOS CON LB.

En los tubos que contenían LB los cuales tenían turbidez, se pudo observar y confirmar la presencia ya la campana se elevo (presencia de gas.). Como se muestra en las imágenes 1,2 y 3.

TUBOS CON BILIS BRILLANTE:

En el bilis brillante se pudo observar que las bacterias tenían una coloración verde transparente, y de nuevo se confirmo la presencia de gas ya que la campana volvió a subir, no hubo

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