COLIFORMES FECALES Y TOTALES

DETERMINACIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES MEDIANTE LA TECNICA DE FILTRACIÓN POR MEMBRANA EN AGUA POTABLE (GRIFO).

MARCELO VALLE

GREILYS QUINTERO

CARLOS FONTALVO

JESSICA PEDROSA

ESTEFANY VILLA

DOCENTE:

YUMAR RUIDIAZ MENDEZ

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

FACULTAD DE INGENIERIA Y TECNOLOGIAS

MICROBIOLOGIA AGROINDUSTRIAL

GRUPO: 01

VALLEDUPAR- CESAR

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INTRODUCCIÓN.

En conjunto los coliformes están representados por cuatro géneros de la familia Enterobacteriaceae: Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, y Klebsiella. Todos ellos son fermentadores de la lactosa en 48 horas.

Se encuentran en el intestino del hombre y de los animales, y también en el suelo, las plantas, etc. No son muy buenos como indicadores, pero se utilizan como indicadores de contaminación fecal y son buenos indicadores de un proceso o de un estado sanitario poco satisfactorio.

En un recuento de coliformes es conveniente determinar la incidencia de E. coli dado que es la especie más indicativa de una contaminación fecal.

Hay que destacar que el recuento de coliformes tiene sus limitaciones como indicador en ciertos alimentos:

- Productos lácteos: reflejan el estado higiénico del establo y de la planta industrial, no es indicador de contaminación fecal.

- Hortalizas congeladas blanqueadas: la presencia de E. coli puede ser indicativo de que en el proceso existe algún problema. Los coliformes están habitualmente asociados con la vegetación.

- Derivados de aves de corral: los coliformes no son indicadores higiénicos apropiados, las aves pueden tener salmonella antes del sacrificio

A pesar de todo lo anterior, los coliformes tienen un valor acreditado como indicadores de inocuidad. Su principal aplicación como integrantes de un programa para la determinación de la inocuidad de los alimentos la tienen dentro del sistema APPCC.

Pueden crecer en presencia de sales biliares, que inhiben el crecimiento de las bacterias Gram negativas. Son capaces de fermentar la lactosa con producción de gas, siendo esta característica suficiente para hacer determinaciones presuntivas. Su facilidad de cultivo y de diferenciación los hace casi ideales como indicadores.

Escherichia coli es un coliforme fecal. Los coliformes fecales son un grupo de microorganismos seleccionados por incubación de los inóculos procedentes de un caldo de enriquecimiento de coliformes a temperaturas superiores a las normales (44 +/-0,5º C) y son muy indicativos de una posible contaminación de origen fecal del alimento. Se definen por producción de ácido y de gas en caldo EC a 44 –46ºC (44,5 – 45,5º C). Las cepas enterohemorrágicas de E. coli no crecen a 44,5ºC en la formulación convencional de EC, pero lo hacen cuando el porcentaje de sales biliares se reduce del 0,15 al 0,112%.

Sólo unas pocas cepas son patógenos verdaderos, enteropatógenos; o patógenos oportunistas.

Es muy resistente en suelo y agua. Muere a 60º C en 15 minutos, y con 0,5 ppm de cloro. Vive en el tracto intestinal del hombre y animales, por eso su presencia en un alimento indica contaminación directa o indirecta de origen fecal. Es indicador de posibles patógenos entéricos en el agua, moluscos, productos lácteos,..

BD EMB Agar (Eosin Methylene Blue Agar), Modified

USO PREVISTO

BD EMB Agar, Modified (fórmula de Holt-Harris y Teague) es un medio ligeramente selectivo y de diferenciación para el aislamiento y la diferenciación de bacilos gram negativos entéricos (Enterobacteriaceae y diversos otros bacilos gram negativos) a partir de muestras clínicas.

PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO

Método microbiológico

EMB Agar se basa en una fórmula originalmente descrita por Holt-Harris y Teague en 1916. La fórmula original de Holt-Harris y Teague posteriormente fue modificada por Levine. La principal diferencia entre las dos es la inclusión de sacarosa en el medio de Holt-Harris y Teague. Ciertos microorganismos entéricos fermentan con mayor facilidad la sacarosa que la lactosa.

BD EMB Agar, Modified contiene colorantes de azul de metileno y eosina , que inhiben las bacterias gram-positivas en cierto grado. Los colorantes también actúan como indicadores diferenciales en respuesta a la fermentación de la lactosa o la sacarosa por parte de los microorganismos. Los coliformes producen colonias de color negro azulado, mientras que las colonias de Salmonella y Shigella son incoloras o de color ámbar transparente. Las colonias de Escherichia coli pueden exhibir un brillo verde metálico característico debido a la rápida fermentación de la lactosa.

El conjunto de medios de aislamiento de baja selectividad para Salmonella en muestras fecales y de otros tipos incluye el EMB Agar (con y sin sacarosa).

Este medio puede inhibir el crecimiento de las bacterias gram-positivas como los

estreptococos fecales, estafilococos y levaduras, o bien favorecer su crecimiento con formación de colonias puntiformes.

pH 7,2 +/- 0,2 Ajustada o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

DETERMINACIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES MEDIANTE LA TECNICA DE FILTRACIÓN POR MEMBRANA EN AGUA POTABLE (GRIFO).

OBJETIVO.

 Determinar la presencia de coliformes totales y fecales mediante la técnica de filtración por membrana en agua Potable. (grifo).

CONTENIDO

FUNDAMENTO: Es el método consiste en hacer pasar la muestra a través de un filtro de membrana impermeable a los microorganismos, después de la filtración quedas retenidas los microorganismos sobre la superficie de la membrana,

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