Pruebas De Identificacion De Proteincas Y Aminoacidos

 Prueba de Ninhidrina

La prueba de ninhidrina es positiva para aminoácidos y proteínas que tengan un grupo NH2 libre. Cuando el grupo -NH2 reacciona con ninhidrina, se forma un complejo azul-violeta. Reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es independiente de la coloración original del aminoácido.

En aquellos casos donde no da positiva la prueba de biuret y da positiva la de ninhidrina, indica que no hay proteínas, pero si hay aminoácidos libres. Como excepción la Prolina la 4-hidroxiprolina reaccionan pero dan un color amarillo.

 Prueba de Sullivan

Es utilizada comúnmente para el reconocimiento de Cisteina y Cistina. Es un método de identificación de aminoácidos que da positivo al grupo sulfhidrilo (R-SH) de la cisteína con una coloración entre rosa y rojo. Da amarillo si es negativo.

 Prueba de Fenoles

Si se desprenden burbujas indica presencia de grupos amino libres y por lo tanto la reacción es positiva.

La reacción xantoproteica es un método que se puede utilizar para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución, empleando ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente en presencia de tirosina con una coloración naranja o rojo, y amarillo en los negativos.

 Prueba Biuret

La prueba Biuret es una prueba general para proteínas, no especifica. Cuando una proteína reacciona con sulfato de cobre (II) (color azul) se forma como respuesta positiva un complejo color violeta (azul morado). Trabaja para cualquier tipo de compuesto que posea uno o más de los grupos siguientes.

La intensidad del color de la reacción es proporcional a la cantidad de proteína en la muestra. El color positivo de la reacción se debe a un complejo de coordinación entre el catión divalente de cobre y cuatro átomos de nitrógeno, des de cada cadena peptídica. Los di péptidos y los aminoácidos no dan positiva la reacción excepto treonina y serina. Se requiere grandes cantidades de proteína para la formación del color (1-5 mgs).

Se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. 1Cu2+ se acompleja con 4 NH. La intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda

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