Práctica 3: “Espectrofotometría de absorción visible: Preparación de un espectro de absorción y una curva estándar”

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

ESCUELA NACIONAL PREPARATORIA #2: "Erasmo Castellanos Quinto"[pic 1][pic 2]

Profesora: Bárbara Cooper

Alumnos:

1. Bautista Mendoza Néstor gabriel
2. Lozano Peña Héctor Adán
3. Mendoza Morales Israel
4. Garduño Martínez Ernesto

Grupo: 600 (Fisicoquímica)

Práctica 3:

“Espectrofotometría de absorción visible: Preparación de un espectro de absorción y una curva estándar”

[pic 3]

Objetivo:

Aprender el uso del espectrofotómetro, así como aprender a preparar un espectro de absorción y una curva estándar.

Hipótesis:

Utilizando el espectro de absorción ¿Se podrá obtener la concentración correspondiente de una muestra problema?

INTRODUCCIÓN

La luz visible es el segmento de energía más importante para la vida y posee una banda estrecha de longitudes de onda que van desde los 400 nm a los 700 nm. Esta radiación es conocida como la luz visible porque el ojo humano puede detectarla en la forma de diversos colores. En el espectro de luz visible el color violeta corresponde al extremo de longitud de onda más corta y el color rojo corresponde al extremo de longitud de onda más larga. Los espectrofotómetros que utilizaremos proporcionan longitudes de onda que van de los 325 a los 1100 nm. Poseen lámpara incandescente de tungsteno-halógeno como fuente de emisiones.  Por medio del análisis de la absorción y reflexión de la luz, el especofotómetro puede proporcionarnos datos para determinar las concentraciones de los componentes de las sustancias. Con esto, se puede crear un análisis cuantitativo y cualitativo de los datos y crear una curva estándar. El análisis cualitativo por espectroscopia de absorción mide la absorbancia de una sustancia a varias longitudes de onda crecientes. Graficando Absorbancia contra Concentración, se obtiene la Curva estándar o gráfico de la ley de Lambert-beer.

En esta práctica, el alumno trabajará con dos colorantes utilizados en alimentos y determinará:

• El espectro de absorción en el visible de este colorante.
• A partir del espectro seleccionará la longitud de onda que utilizará para la curva estándar.
• Elaborará la curva estándar y determinará la concentración de una muestra.

MATERIALES:

PROCEDIMIENTO:

1. Calibración del espectrofotómetro Prender el equipo llevando la llave hacia arriba. Esperar 15 minutos para que los circuitos alcancen temperatura. Elegir la longitud de onda deseada con el selector.

2. Prepare las siguientes soluciones del colorante, utilizando agua:

1. Sol. N°1.-Concentración = 1000 ppm; prepare 100 ml.
2. Sol. N°2.- Concentración=10 ppm; prepare 100 ml (a partir de la solución N°1)
3. Sol. N°3.- Concentración = 2ppm; prepare 100 ml (a partir de la solución N°1)
4. Sol N°4.- Concentración= 4 ppm; prepare 100 ml (a partir de la solución N°1)
5. Sol N°5.-Concentración=6 ppm; prepare 100 ml (a partir de la solución N°1)
6. Sol N°6.- Concentración= 8 ppm; prepare 100 ml (a partir de la solución N°1)[pic 4][pic 5][pic 6]

[pic 7]

 3. ESPECTRO DE ABSORCIÓN. Utilice la solución número 2 y lea en un rango de longitud de onda de 380-740 nm, a intervalos de 36 nm. Determine la absorbancia. Recuerde que el espectrofotómetro se debe ajustar a cero con el solvente (BLANCO), previo a las determinaciones de la absorbancia. Haga el gráfico de absorbancia contra longitud de onda. Elija la longitud de onda más adecuada para la realización de la curva estándar. [pic 8]

4.CURVA ESTÁNDAR. Habiendo fijado la longitud de onda elegida, determine la absorbancia de las siguientes soluciones, número 3, 4, 5, 6 y 2, en este orden. Utilice agua como BLANCO. Haga el gráfico de absorbancia contra concentración. Determine la concentración de la muestra problema que de la misma sustancia le proporcionará el profesor y reporte este dato.[pic 9]

5. CUESTIONARIO

Definiciones:

• Absorbancia: Es la relación logarítmica entre la intensidad de luz que incide sobre la muestra y la intensidad de esa misma luz que se transmite a través de esa muestra.
  Una de las ventajas de la técnica de recuento por centeno- líquido, es la posibilidad de mezclar directamente una amplia gama de materiales con el disolvente y el soluto de centelleo. Sin embargo, algunas sustancias reducen la eficiencia de centelleo (extinción química).
• Extinción: Es la parte imaginaria del Índice de refracción, que también está relacionado con la absorción de luz.
• Densidad óptica: La densidad óptica es la absorción de un elemento óptico por distancia de distancia, para una longitud de onda dada: En el caso de que se produzca un error en el sistema, se debe tener en cuenta que, en el caso de que se produzca un error, donde:

l = la distancia que la luz viaja por una muestra (i.e., el grosor de la muestra), medido en cm

Aλ = la absorción a longitud de onda λ

...