Práctica CCF Y CC
Enviado por ANGGE KATHERINNE ORTIZ ZAMBRANO • 27 de Julio de 2022 • Informes • 1.442 Palabras (6 Páginas) • 38 Visitas
UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA Y TECNOLÓGICA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS
QUÍMICA ANALÍTICA III GRUPO 1- 3
Título de la práctica: Cromatografía en capa fina - Cromatografía en columna
Integrantes: Dayra Liseth Bohórquez León - Angge Katherinne Ortiz Zambrano.
- OBJETIVOS
- MARCO TEÓRICO
- DIAGRAMA DE FLUJO
- RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1. Extracción
Se pesaron aproximadamente 1,0548 g de hojas de espinaca, posteriormente se lavó las hojas con agua, se retiraron los nervios, y se dispusieron en un mortero junto a 11 mL de acetona y 1,5 mL de hexano, para luego triturar las hojas hasta que el disolvente adquiriera un color verde intenso, para finalmente extraer con cuidado el disolvente el cual contiene el pigmento de la espinaca evitando extraer residuos de las horas que puedan tapar la pipeta.
4.2. Cromatografía en papel
En la experiencia realizada, nombrada
“cromatografía”, como ya se planteó anteriormente,
en el detalle experimental, luego de recortar el
papel filtro y realizar cada uno de los montajes,
esperamos a que se mostrara el “rastro de colores”
o “registro de colores” que se produciría después
de que el etanol subiera por el papel filtro, esto es
debido a que los centros activos polares de la fase
estacionaria fueron adsorbidos por la fase móvil
(en nuestro caso el etanol) y a medida que este
avanza por la fase estacionaria lleva consigo los
centros activos, dando como resultado el rastro
obtenido.
En la experiencia realizada, nombrada
“cromatografía”, como ya se planteó anteriormente,
en el detalle experimental, luego de recortar el
papel filtro y realizar cada uno de los montajes,
esperamos a que se mostrara el “rastro de colores”
o “registro de colores” que se produciría después
de que el etanol subiera por el papel filtro, esto es
debido a que los centros activos polares de la fase
estacionaria fueron adsorbidos por la fase móvil
(en nuestro caso el etanol) y a medida que este
avanza por la fase estacionaria lleva consigo los
centros activos, dando como resultado el rastro
obtenido.
Para la cromatografía en papel, se realizó la selección de la fase móvil adecuada a partir de los solventes disponibles los cuales correspondieron a etanol, mezcla Acetona: Hexano (7:3) y cloroformo. Cada solvente fue sometido a una prueba cromatográfica al adicionarlo en una tira de papel filtro (3x6), a la cual a su vez se le trazó una línea la cual media 0,5 cm con respecto al borde inferior en donde se realizó un punto en la mitad cuya función era indicar el punto de partida donde debía disponerse el pigmento extraído previamente preparado. Después de preparar estas cámaras cromatográficas, se introduce cada una de las tiras etiquetadas en cada uno de los eluyentes correspondientes y después se tapan con vidrio reloj. Se espera hasta que la muestra ascienda, retirando antes de que llegue a la línea superior y se deja secar la placa para después hacer la medición de las distancias recorridas por el solvente y la muestra. Luego, se identifica y selecciona el mejor solvente que presenta más cantidad de colores y la mayor distancia recorrida por la muestra, lo cual se indica calculando el factor de retención obtenido.
[pic 1]
Figura 1. Cromatografía en papel para el pigmento de la espinaca con los diferentes solventes
[pic 2]
Tabla 1. Resultados obtenidos para la cromatografía en papel
Eluyente | Distancia recorrida por la muestra (cm) | Distancia recorrida por el solvente(cm) | Factor de retención |
Etanol | 3,9 | 4,2 | 0,929 |
Acetona: Hexano (7:3) | 5,0 | 5,3 | 0,943 |
Cloroformo | 5,1 | 5,2 | 0,981 |
4.2.1. Discusión de resultados
De acuerdo a los resultados obtenidos en la Figura 1, se seleccionó el mejor sistema de solventes para la fase móvil en el desarrollo de la cromatografía en papel para la clorofila presente en las hojas de espinaca, siendo el solvente de cloroformo seleccionado como mejor eluyente, debido a que se observó un desplazamiento de muestra casi completo y sin separación de compuestos pigmentados. Esto indica que las sustancias presentes en la clorofila son sustancias con una polaridad y fuerzas intermoleculares afines al medio, ya que el solvente elegido y las sustancias son especies químicas polares; generando un equilibrio de adsorción-desorción que dependen de estos dos factores mencionados anteriormente; además, se observa que es el primer sistema de solventes que posee un mayor Rf (0,981) (presentados en la Tabla 1), siendo el tercero la el etanol , con un Rf de 0,929; pero, este no fue escogido, ya que presentaba una estela de color y una pigmentación baja que indicaba la presencia de reacción con la celulosa del papel y por tanto una absorción en este. Para el caso de la mezcla Acetona: Hexano, si esta hubiera sido constituida únicamente por un disolvente no polar como el hexano, las clorofilas no se podrían separar debido a que quedarían absorbidas en el punto de aplicación; pero, la adición de un disolvente polar, como la acetona, posibilita la generación del equilibrio adsorción-desorción mencionado anteriormente, es por ello que esta mezcla se considera un buen eluyente para este tipo de cromatografía con un Rf de 0,943.
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