RECUENTO AEROBIOS MESÓFILOS
Enviado por helennetorres • 21 de Septiembre de 2014 • 498 Palabras (2 Páginas) • 267 Visitas
INSTRUCTIVO DE ANÁLISIS
RECUENTO AEROBIOS MESÓFILOS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
ALCANCE
CAMPO DE APLICACIÓN
REFERENCIAS
Directiva 20.83-05 Productos Pesqueros de Exportación. Métodos Estandarizados de Análisis Microbiológico
RECUENTO DE GÉRMENES AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES EN PLACA
A. PRELIMINARES
La determinación de los gérmenes aerobios mesófilos viables a través del método del recuento en placa, es utilizado para indicar la carga bacteriana de un producto.
Es de utilidad en productos fresco-enfriados, congelados, precocidos o alimentos preparados.
Principio base del método.
El método se basa en incubar en agar de recuento en placa, a 35ºC y durante 48 hrs., volúmenes medidos de diferentes diluciones de la muestra, y contar el número de colonias producidas para determinar el número de gérmenes viables o unidades formadoras de colonias por gramo de muestra.
B. PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra.
Asépticamente pesar 10 g. de muestra y diluír en 90 ml. de agua peptonada (A-23).
Homogenizar la mezcal por trituración en un vaso esterilizado de licuadora a una velocidad aproximada de 14.000 rpm y en un tiempo medio de 60-90 segundos.
Diluciones.
Según el número de gérmenes esperado y sobre la base de la solución inicial de 10 g. en 90 ml. (dilución 10-1), preparar diluciones decimales de 10-2, 10-3, 10-4, usando pipetas estériles para cada dilución, tomando 1 ml. de la solución anterior en 9 ml. de agua peptonada (fig. 1), evitando se forme espuma. Mezclar manualmente cada dilución agitándola 25 veces en 7 segundos con movimientos ascendentes y descendentes formando un ángulo de abertura aproximado de 60º entre brazo y antebrazo.
Técnica.
1. Asépticamente pipetear 1 ml. de cada dilución y sembrar por duplicado en placa Petri previamente identificada. Volver a mezclar la dilución a usar, si ésta ha permanecido más de 3 minutos sin agitar.
2. Agregar a cadA una de las placas 12-15 ml. de agar de recuento en placa (A-21) previamente fundido a baño maría y enfriado a 44-46ºC. No deberá transcurrir un tiempo mayor de 15 minutos entre la
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