Reporte 3 bioquimica

Introducción

La homogeneización es un paso muy común en la preparación de nuestras bilógicas antes del análisis de ácidos nucleicos y proteínas, o del estudio de células y sus organelos por separado. Como resultado queda un apasta fina que consiste de las células y sus organelos por separado. La homogenización es un proceso que combina diversas sustancias para producir una mezcla uniformemente consistente. La homogenización se utiliza principalmente con componentes que no son solubles uno en el otro, que apenas son miscibles o no son miscibles en absoluto. Los sólidos generalmente se pueden homogenizar por agitación. Otro método para lograr nuestro objetivo es la centrifugación, que es una técnica de transporte basada en el movimiento de las partículas, suspendidas en un medio liquido especifico, impulsadas por una fuerza denominada centrifuga, que tiende a desplazarlas hacia afuera del centro de rotación. Tanto la viscosidad de la disolución-muestra (esto es de gran interés para las aplicaciones analíticas) como las propiedades físicas de las partículas afectaran a la sedimentación individual de las mismas. Para nuestra experimentación llevamos a cabo la centrifuga a escala preparativa ya que consiste en aislar partículas para su aprovechamiento posterior, por lo que obtendremos un líquido sobrenadante y un material sedimentado. La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.

Objetivos

Establecer métodos de separación con una muestra biológica (hoja de espinaca) así como sus ventajas y desventajas de cada método y aplicar técnicas físicas de separación como la homogeneización, centrifugación y cromatografía en papel y columna y poder obtener pigmentos vegetales de la hoja de espinaca e identificarlos.

Metodología

La indicada en el manual de Bioquímica Estructural correspondiente a la práctica “Homogenización, centrifugación y cromatografía”, pagina 29.

Observaciones y resultados

Cálculos y gráficos

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