TP de Reinos Unicelulares
Damián ProtzerTrabajo11 de Abril de 2017
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ESTABLECIMIENTO: “Instituto Superior del Profesorado San Benito” D- 93
CARRERA: Profesorado de Educación Secundaria en Biología - Res. N° 0761/14 CGE
CAMPO: De Formación Específica
ESPACIO: Reinos unicelulares
CURSO: 2º Año.
HORAS SEMANALES: 2 (dos) horas
PROFESORA: Analía Beatriz Francischelli afrancischelli@arnet.com.ar
CICLO LECTIVO: 2016
TRABAJO PRÁCTICO INTEGRADO (alumnos regulares)
FECHA DE ENTREGA: 4 de noviembre de 2016 – 17 de febrero de 2017
- OBJETIVOS
- Investigar las características y usos del microscopio óptico y el electrónico
- Diferenciar técnicas de desinfección y esterilización
- Realizar tinciones microbiológicas
- Adquirir destreza en la identificación de bacterias
- Aplicar los conceptos adquiridos en el trabajo experimental.
- METODOLOGIA DE TRABAJO
La docente brindará la Técnica Operatoria referente al presente trabajo práctico, orientará la realización de las actividades, supervisando la corrección de los procedimientos y brindando sugerencias cuando se considere necesario. El informe deberá presentarse en tiempo y forma individualmente.
Actividad N°1: Investigación bibliográfica
- Realizar un cuadro comparativo de las características y usos del microscopio óptico y del microscopio electrónico.
- Señalar la diferencia entre esterilización y desinfección.
- Comparar los métodos de esterilización por calor seco (estufa) y por calor húmedo (autoclave) teniendo en cuenta: mecanismo de acción, tiempo, temperatura y tipo de material a tratar.
- ¿Pasteurización es sinónimo de esterilización? Decir en qué casos se aplica la Pasteurización. Fundamentar la respuesta.
- ¿Qué es un medio de cultivo? Explicar cuando un medio de cultivo es enriquecido, de transporte, selectivo y/o de enriquecimiento.
- Investiga sobre la utilización industrial de los organismos unicelulares: producción de alimentos y bebidas alcohólicas, tratamiento de efluentes, industria farmacéutica.
Actividad N°2: Observación microscópica en fresco y muestras coloreadas.
Observación en fresco: colocar una gota de la muestra entregada por la docente entre portaobjeto y cubreobjeto. Realizar observaciones al microscopio en 10x, 20x y 40x. Registrar las observaciones
Observaciones de muestras teñidas
Fijación de la muestra
- Se toma un portaobjetos previamente desengrasado y se coloca en el centro del mismo una gota de la muestra utilizando el ansa ojal. Se extiende con el ansa en forma de capa delgada y uniforme.
- Se procede a la fijación del extendido. Para ello se pasa lentamente el portaobjeto, en forma horizontal, sobre la llama del mechero manteniendo el extendido hacia arriba. La operación se repite hasta sequedad total, cuidando evitar la combustión del extendido.
Tinción simple
Sobre el extendido seco se colocan unas gotas de azul de metileno y se deja actuar 2 o 3 minutos. Se elimina el exceso de colorante lavando con agua de forma suave, con ayuda de pipeta. Se seca el extendido. Se observa al microscopio en 100x. Registrar las observaciones.
Tinción diferencial. Método de Gram
Sobre el extendido realizado se realiza el siguiente tratamiento:
Se tiñe 20seg con Violeta Cristal, se lava con agua, se cubre con solución
Yodada durante 30seg y se lava con agua, decolorar con mezcla alcohol etílico/acetona 10seg. Escurrir y cubrir con Safranina (color de contraste) durante 20seg. Lavar y secar. Observar al microscopio en 100 x. Registrar las observaciones.
Informe:
- Informar las observaciones en cuanto a forma, coloración, movilidad, agrupación.
- Realizar dibujos referidos a lo observado.
- ¿Cuál es la aplicación de las preparaciones en fresco? ¿Y de las tinciones?
- Investigar bibliográficamente o en Internet:
- Qué es y para qué se utiliza la tinción de Ziehl Neelsen
- Por qué se emplea la tinción negativa para la observación de cápsulas
- Dibujar la pared celular de una bacteria Gram positiva y una Gram negativa.
- CRITERIOS DE EVALUACIÓN
- Elaboración activa y reflexiva del trabajo...............................: 50 %
- Presentación de informe individual en término.......................: 10 %
- Redacción, ortografía y calidad en la presentación..................: 20 %
- Uso de lenguaje específico........................................................: 20 %
- BIBLIOGRAFÍA
- Ídem planificación de la asignatura
Introducción
El siguiente trabajo tiene como objetivo analizar algunas cuestiones sobre los Reinos Unicelulares, para ello realizaremos un trabajo de investigación bibliográfica, y un trabajo de análisis de muestras para poder graficar algunos microorganismos.
Antes de empezar sería bueno analizar algunas cuestiones, que nos ayudaran a tener un mejor entendimiento de los temas que vamos a desarrollar.
- ¿Qué son los microorganismos?
Son formas de vida tan pequeñas que no pueden ser observadas a simple vista. Que sean muy pequeños no quiere decir que sean simples, existen tantos tipos de microorganismos como tipos de complejidad. En este grupo están incluidas las bacterias, los virus, los mohos y las levaduras.
- ¿Cómo podemos observar a los microorganismos?
La forma correcta de observar microorganismos es con el microscopio, pero vale destacar que dependiendo del tamaño y de lo que deseemos observar específicamente, debemos tener en cuenta que tipo de microscopio usaremos, además de las preparaciones que podemos hacer para mejorar su observación.
Los microscopios más utilizados son: óptico y electrónico.
- Clasificación de los microorganismos
Los microorganismos, se clasifican en cuatro grupos: bacterias, virus, hongos y parásitos; cada uno de estos grupos posee aspectos diferentes en cuanto a su relación, estructura, morfología, nutrición y reproducción.
- Pequeña reseña histórica
Desde los inicios de las ciencias (con origen en la filosofía), el hombre se ha interesado por aquellos eventos que sucedían sin explicación alguna, al principio se le atribuían dichos sucesos a la intervención divina, pero con el paso de los años se fue comprobando la existencia de microorganismos que llevaban a cabo procesos que explicaban de manera racional cosas como la descomposición.
- 1546: Girolamo Frascatoro estudia enfermedades contagiosas y propone una teoría sobre su origen.
- 1677-1684: Antony van Leeuwenhoek describe las primeras observaciones realizadas con microscopios caseros de los microorganismos.
- 1837: Theodore Schwann realiza los primeros experimentos relacionados con la fermentación y la putrefacción originados por microorganismos.
- 1857-1861: Louis Pasteur realiza una serie de experimentos que demuestran el origen de procesos de fermentación láctica, alcohólica, existencia de microorganismos anaerobios y demuestra que sólo puede producirse crecimiento microbiano a partir de microorganismos preexistentes.
- 1880-1881: Louis Pasteur desarrolla vacunas frente a varias enfermedades víricas.
- 1884: Christian Gram desarrolla su método de tinción de bacterias.
- 1929: Alexander Fleming descubre la penicilina.
Desarrollo
Actividad 1: investigación bibliográfica
- Realizar un cuadro comparativo de las características y usos del microscopio óptico y del microscopio electrónico.
Microscopio óptico | Microscopio electrónico | |
Lentes | De cristal o vidrio, con distancias focales fijas. | Magnéticas, a partir de metales magnéticos, alambre de cobre enrollado, cuya distancia focal varia en relación con la corriente que pasa por la bobina de cobre. |
Aumento | Se corrige cambiando los objetivos, rotando el revólver. | El aumento del objetivo es fijo (distancia focal) mientras que la distancia focal de la lente proyectora varia para lograr los aumentos. |
Profundidad de campo | Pequeña, por lo que se pueden ver diferentes planos de enfoque al mover el tornillo micrométrico. | Mayor, por lo que se puede ver enfocado todo el espesor del corte ultrafino del espécimen. |
Fuente de la radiación | Haz de luz: fotones. Generalmente situada por debajo del espécimen (aunque hay excepciones). | Haz de electrones. Ubicada siempre en lo alto del instrumento, por encima del espécimen. |
Alto vacío | No es necesario. | Imprescindible, para facilitar el desplazamiento de los electrones. |
Resolución | 0,2 µm | 0,2nm |
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