Virus de la rabia

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Virus de la rabia[pic 1]

Daniel M. Cisterna

La rabia es una enfermedad infecto-contagiosa de evolución aguda, habitualmente mortal. Esta enfermedad se caracteriza por presentar lesiones SNC, y es causada por el virus de la rabia que se transmite entre los animales de sangre caliente y el hombre. Por tal motivo, se encuentra clasificada entre las zoonosis. La rabia es la décima causa de muerte entre las enfermedades infecciosas, produciendo 60 000 decesos anuales.

1. GENERALIDADES

1. CLASIFICACIÓN

El virus de la rabia pertenece a la familia Rhabdoviridae (del grie- go, rhabdos, bastón). Los miembros de esta familia se clasifican en tres géneros de virus animales: Lyssavirus, Ephemerovirus y Vesi- culovirus. El género Lyssavirus contiene siete especies: el virus de la rabia, el virus del murciélago de Lagos, el virus Mokola, el virus Duvenhage, los lisavirus del murciélago europeo tipo 1 y tipo 2 y el lisavirus del murciélago australiano (Tabla 26.1). Recientemen- te, cuatro nuevas especies, aisladas de murciélagos insectívoros de Euroasia, han sido propuestas: virus Aravan, virus Khujand, virus Irkut y virus del murciélago blanco del Cáucaso.

1. ESTRUCTURA

El virus de la rabia posee una forma característica de bala, de 100- 430 nm de longitud y 45-100 nm de diámetro. La superficie del virus consiste en una envoltura de doble capa lipídica que deriva principalmente de la célula hospedadora, donde se insertan espícu- las. La envoltura encierra una nucleocápside helicoidal infecciosa de 30 a 35 vueltas. El genoma del virus de la rabia está constituido por una única molécula de RNA no segmentado de polaridad nega- tiva de aproximadamente de 12 000 nucleótidos. El RNA codifica cinco proteínas en el siguiente orden 3’ N-P-M-G-L 5’: la proteína N (componente principal de la nucleocápside), la fosfoproteína P, la proteína de la matriz M (ubicada por fuera de la nucleocápside y en la superficie interna de la envoltura), la glicoproteína G (constituye las espículas que se insertan en la envoltura) y la proteína L (poli- merasa viral RNA dependiente). Las proteínas N, P y L constituyen la nucleocápside. (Figura 26.1). La asociación de ésta con el geno- ma viral forma la ribonucleoproteína del virus. Las proteínas L y P actúan conjuntamente para desarrollar la actividad de polimerasa.

1. REPLICACIÓN

Luego de la adsorción a un receptor celular el virus penetra median- te la invaginación de la membrana celular hacía vesículas donde se produce la remoción de la envoltura viral. La nucleocápside es entonces liberada hacia el citoplasma. La remoción de dicha envol- tura activaría el complejo polimerasa para iniciar los procesos de transcripción y replicación.

Dado que el genoma viral es de sentido negativo, es decir, tiene una polaridad opuesta al RNA mensajero (RNAm), el primer paso es la transcripción del RNAm viral. Dicho proceso, comienza en el extremo 3’ y sigue un orden predeterminado: síntesis de una se- cuencia corta de RNA líder, seguida de los RNAm de los 5 genes estructurales, en el mismo orden en el que se los detecta en el ge-

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Figura 26.1. Estructura del virus de la rabia. (A) Corte lon- gitudinal; (B) Corte transversal; (C) Genoma viral. Adaptado de http://www.cdc.gov/ncidod/dvrd/rabies

noma. La transcripción de los diferentes RNAm ocurre en una serie continua de eventos, con la particularidad de exhibir una frecuencia decreciente en un 30-40% en las sucesivas uniones genéticas, lo que produce un gradiente de producción de RNAm, de N>P>M>G>L. Este proceso transcripcional permite la posterior síntesis de las dife- rentes proteínas virales en proporciones diversas. El ensamblaje de las unidades que conforman la nucleocápside induciría al complejo polimerasa a ignorar las señales de terminación y procesamiento inherentes a la transcripción e iniciar la replicación viral.

El proceso de replicación consiste en el desarrollo secuencial de dos eventos: 1) síntesis de RNA de polaridad positiva, de idéntica longitud que el genoma viral cuya secuencia es complementaria a éste; y 2) síntesis de cadenas negativas utilizando como templado las cadenas positivas. Estas cadenas serán incorporadas a la progenie viral, que se ensambla en el citoplasma. La proteína G sintetizada es transportada, luego de su glicosilación, hacia la membrana celular donde queda anclada a través de su extremo carboxilo en la bicapa lipídica. Finalmente, las nucleocápsides migran hacia estas áreas mo- dificadas, donde se distribuyen y a través de las cuales brotan. En este proceso de brotación la glicoproteína G y los lípidos de la membrana envuelven a la nucleocápside. La proteína M es incorporada al virión inmediatamente antes de la brotación del mismo.

Tabla 26.1. Miembros del género Lyssavirus. 1Cánidos: principalmente perros, lobos, zorros, coyotes, y chacales, 2mús-

télidos: principalmente armiños, comadrejas, hurones, tejones y nutrias, 3vivérridos: principalmente mangostas.

1. [pic 20]PROPIEDADES BIOLÓGICAS[pic 21]

El virus de la rabia puede infectar a todos los animales de sangre caliente bajo condiciones experimentales, pero sólo los mamíferos son hospedadores naturales importantes. Las especies que son reser- vorios incluyen a perros, zorros, chacales, coyotes, lobos, armiños, comadrejas, hurones, tejones, mangostas y murciélagos. Muchas es- pecies han sido infectadas experimentalmente con virus de la rabia, incluyendo aves. Los roedores, tales como ratones de laboratorio, se han utilizado ampliamente para el diagnóstico, ensayos de potencia de vacunas y estudios de patogenicidad.

Desde los estudios de Pasteur, las cepas de virus rábico se han clasificado por sus características biológicas en virus calle y virus fijo. Los virus calle son cepas aisladas de animales infectados na- turalmente, de alta patogenicidad al inocularse por vía intramuscu- lar, que producen enfermedad al cabo de períodos de incubación variable y que se eliminan por saliva. Los virus fijos son cepas que luego de sucesivos pasajes en animales de laboratorio producen la enfermedad tras un período de incubación más constante (fijado) en estos hospedadores; exhiben una patogenicidad reducida al ser inoculados por vía intramuscular, pero muy alta por vía intracere- bral y no se eliminan por saliva. Los cultivos primarios de riñón de hámster, perro, cerdo y de otras especies se utilizan para el ais- lamiento y propagación de cepas de virus fijo y calle de la rabia. En particular, la línea celular continua BHK-21 es una de las más usadas, dado que es muy sensible a la infección y produce altos títulos virales. Aunque estas células se usan ampliamente para la propagación de virus fijo, el aislamiento de cepas calle de virus de la rabia no es consistentemente realizado en ellas y debe utilizarse cultivo de células primarias o líneas celulares de neuroblastomas de origen murino tales como las MNA.

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