SSPráctica. Aislamiento de microorganismos

Nombre de la técnica

Fundamento

Material empleado para lograr el aislamiento

Por diluciones

Se hace uso de tubos o

Lápiz        graso,        masking        tape,        dos

matraces        con        solución

cajas de petri con agar nutritivo, asa

salina        o        amortiguadora

de siembra, muestra con población

con la que se preparan

microbiana mixta, mechero,gradilla,

diluciones sucesivas del

baño de temperatura controlada a

inóculo,        disminuyendo

45 °C, dos tubos de ensayo 22x174

progresivamente        la

con 18 mL de agar nutritivo fundido

cantidad        de

y mantenido en el baño de 45 °C.

microorganismos,        para

que al reproducirse se

forme una clona.

Se emplean medios de

Lápiz        graso,        masking        tape,        dos

Por agotamiento

cultivo sólidos y siembra

cajas de petri con agar nutritivo, asa

por estría de cuadrantes,

de siembra, muestra con población

el        inóculo        disminuye

microbiana mixta, mechero,gradilla,

progresivamente en cada

baño de temperatura controlada a

estría        sucesiva.        Las

45 °C, dos tubos de ensayo 22x174

estrías        iniciales

con 18 mL de agar nutritivo fundido

presentan un desarrollo

y mantenido en el baño de 45 °C.

confluente, en las últimas

estrías        se        desarrollan

colonias aisladas.

Captura

de

un

solo

Para        purificar

Lápiz        graso,        masking        tape,        dos

individuo

microorganismos

cajas de petri con agar nutritivo, asa

grandes        como        los

de siembra, muestra con población

protozoos        y        las        algas.

microbiana        mixta,

Implica el uso de una

mechero,gradilla,pipeta        capilar,dos

pipeta        capilar        y        la

tubos de ensayo 22x174 con 18 mL

subsiguiente

de        agar        nutritivo        fundido        y

transferencia        de        este

mantenido en el baño de 45 °C.

individuo        a        través        de

varios        lavados        en

volumen de medio esteril

con el fin de eliminar a

los microorganismos de menor tamaño.

Nombre        de        medio        de

cultivo

Formula en gramos por litro

Función de cada ingrediente

Agar anaeróbico de Brewer

Agar bacteriológico 15g.

Peptona de caseína 17.5 g. dextrosa 10 g. L-cisteína 0.4

g. Azul de metileno 0.002 g. Cloruro de sodio 2.5g.

Tioglicolato sodico 2g. Peptona de soja 2.5 g y

Sulfoxilato formaldehido de sodio 1g.

La peptona de caseína y la peptona de soja: Proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento.

Dextrosa:Carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía.

Tioglicolato sódico y el formaldehído sulfoxilato sódico: Agentes reductores que generan bajo potencial de oxidación-reducción, asegurando así buenas condiciones anaeróbicas.

Azul de metileno:Indicador redox, el color azul indica la presencia de oxígeno

Agar cerebro corazón

Infusión de cerebro de ternera 200 g. Infusión de corazón 250 g. Peptona:10 g. Cloruro de sodio 5 g. Glucosa 2 g. Fosfato disódico 2.5 g y Agar bacteriológico 2.5 g

La infusión de cerebro de ternera, la infusión de corazón vacuno y la peptona: Fuente de carbono, nitrógeno y vitaminas. Glucosa: Hidrato de carbono fermentable.

Cloruro de sodio: Mantiene el balance osmótico.

Fosfato disodico: Buffer.

Agar: Agente solidificante

Agar sangre

Infusión de músculo de corazón 375 g. Peptona 100

g. Cloruro de sodio 5 g y Agar 15 g.

La infusión de músculo del corazón y peptona: Otorgan al medio un alto valor nutritivo.

Cloruro de sodio: Mantiene el balance osmótico.

Agar:Agente solidificante.