PROGRAMA DE INGENIERÍA PESQUERA SANTA MARTA 2016-1

  AUTORES:

CURSO DE BIOLOGÍA GENERAL

Diversidad celular 1) células procariotas: tinción y su observación

UNIVERCIDAD DEL MAGDALENA FACULTAD DE INGENIERIA

EDITOR: PABLO MOSCOTE 2016113067

                JOSE MARTINEZ 2016113061

PROGRAMA DE INGENIERÍA PESQUERA SANTA MARTA 2016-1

        Diversidad celular 1. Células procariotas tinción y su observación

MOSCOTE PABLO      MARTINEZ JOSE

Resumen

Es estudio de las bacterias juega un papel fundamental en la biología celular, debido a la importancia del funcionamiento de estas en los procesos industriales, agrícolas y médicos-investigativos. El presente laboratorio tiene como finalidad observar algunas características que presentan las bacterias que se desarrollan en bebidas lácteas, aplicar una técnica de coloración para estudiar la estructura de las bacterias y si es posible su fisiología y finalmente reconocer las diversas formas y tamaños de las diversas células procariotas contenidas en un frotis de kumis, bucal y vaginal. La metodología de llevará a cabo mediante una serie de facetas que incluyen la preparación de un frotis, la técnica para la coloración de bacterias (coloración simple y técnica de Hucker) y finalmente el análisis a través de un frotis vaginal y bucal y un frotis de kumis de la relación existente entre células eucariontes y procariontes.

Palabras clave- Frotis, bacteria, lactococo, cocos, vibrión, estreptococos, estafilococos, tinción, coloración.

Abstract.

 The study of bacteria is essential in cell biology because its importance of the operation of these industrial processes, agricultural and medical-research. This laboratory is intended to point out some characteristics that have the bacteria growing in milk drinks, a staining technique applied to study the structure of bacteria and if possible their physiology and finally recognize the different shapes and sizes of the various cells prokaryotes contained in a smear of buttermilk, oral and vaginal. Methodology carried out through a series of facets including a smear preparation, the technique for staining bacteria (simple staining technique and Husker) and finally through an analysis vaginal and buckle swab kumis of the relationship between eukaryotes and prokaryotes cells. 1

Keywords- Smears, bacteria, lactococo, coconuts, vibrio, streptococcus, staphylococcus, staining, coloring

Direccion de autores

95moscote@gmail.com   joarmarram2015@gmail.com

INTRODUCCIÓN

El avance en el estudio de las células procariotas (dentro de la biología celular) ha ido de la mano con la mejora del microscopio y las técnicas de microscopía2. Ya en 1676 Antonio Van Leeuwenhoek, un pulidor de lentes holandés, mezcló pimienta con agua y después de una o dos semanas observó una gota de esta infusión haciendo uso del microscopio simple, de este modo fueron descubiertas las bacterias2, las cuales son importantes debido al papel que cumplen en el ámbito de la industria, la medicina, y la agricultura; la mayoría de las bacterias son unicelulares, sin embargo tienen la tendencia a la agregación. Morfológicamente (de acuerdo a su forma), las bacterias se pueden

clasificar en: COCOS cuando tienen forma redondeada o esférica, BACILOS cuando tienen forma de bastón, ESPIRILOS en forma de espiral, VIBRIÓN cuando su estructura es análoga a la de una coma; cuando hay agregaciones se pueden denominar ESTREPTOCOCO si los cocos se disponen linealmente y ESTAFILOCOCOS si se agrupan en forma de racimos3. LAS TINCIONES para observar las bacterias se preparan en soluciones acuosas y orgánicas de colorantes que confieren una gran variedad de colores a los microrganismos y materiales biológicos, y permiten demostrar las funciones fisiológicas de los microrganismos; en este caso, el objetivo es observar algunas características de las bacterias que interactúan en bebidas lácteas, aplicar una técnica de coloración para estudiar la estructura de las bacterias y finalmente reconocer las diversas formas y tamaños de las células procariotas4.

MATERIALES Y REACTIVOS

Los implementos usados para el siguiente laboratorio se han clasificado en tres grupos. 1) De laboratorio: asa microbiológica, caja de Petri, beaker, toallas de papel secante, aceite de inmersión, microscopio, portaobjetos, bata de laboratorio, guantes, goteadores y mechero. 2) Reactivos: Azul de metileno, solución colorante de cristal violeta, colorante de Gram. 3) otros: Kumis o yogurt, células bucales y vaginales, libreta de apuntes, guía de laboratorio y bolígrafo.

MÉTODOS

A) preparación de un frotis: Se limpia el porta objetos y los implementos a utilizar (si es necesario esterilizar algunos, se procede), Se agrega kumis a una caja de

Petri la cual se manipula con la mano derecha de modo que solo se levante un poco, unos 40° o 50 °. Se toman dos beaker y se les vierte agua, se ingresa el asa microbiológica a uno de ellos, seguidamente se esteriliza en asa de inoculación al ponerse en contacto con la llama azul del mechero, tomando esta una coloración rojiza, luego, se sumerge el extremo esterilizado del asa, en uno de los beaker con agua (preferiblemente el que no ha sido utilizado) y de aquí se procede a maniobrar la caja de Petri y a retirar con el asa una muestra de kumis para hacer un frotis; la muestra de kumis se vierte sobre el portaobjetos en forma de zig-zag, una sola vez, (proceso de extendido del material) acto continuo se acelera el secado manteniendo la lámina a 15 centímetros sobre la llama del mechero y finalmente se fija la muestra pasando el frotis seco tres veces con rapidez y minuciosidad sobre la llama para que al momento de agregar el reactivo y verter agua, la muestra no se arrastre (VER FIGURAS 1.1). B) 1- Coloración simple o tinción sencilla: Se toma el frotis anterior y se ubica en un soporte de tinciones, se vierten sobre la muestra fijada 3 gotas del colorante azul de metileno y se deja actuar durante 1 minuto, luego se lava con agua (botella de lavado) hasta que el colorante sobrante se fluya fuera, se pasa papel absorbente bajo el porta objetos para no dañar la muestra y se seca rápida y minuciosamente la misma encima del mechero, acto continuo se observa al microscopio con el objetivo 100X donde se emplea el aceite de inmersión y se

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