Efecto Del Aceite Esencial Sobre El Crecimiento Microbiano

PRACTICA N°9

EFECTO DEL ACEITE ESENCIAL SOBRE EL CRECIMIENTO MICROBIANO

1. I. COMPETENCIAS

• Determinar el efecto del aceite esencial sobre el crecimiento microbiano de S. aureus.

• Determinar la concentración de aceite esencial que inhibe mejor el crecimiento microbiano.

II. FUNDAMENTO

Los discos de sensibilidad se usan para determinar la suceptibilidad de microorganismos frente a una variedad de agentes antimicrobianos.

Esta prueba se usa para determinar la suceptibilidad o resistencia de un organismo patógeno frente a un agente antimicrobiano en particular.

Esta práctica se basa en la siembra del microorganismo de interés en placas con el agar selectivo correspondiente, y luego en la colocación de discos de papel filtro expuestos al aceite esencial de estudio en concentraciones y en un tiempo determinado. Los mismos que luego serán colocados sobre la placa Petri sembrada y luego dichas placas serán incubadas a 37°C durante 48 horas. Luego se observará la placa y con ayuda del Vernier se determinará si el aceite esencial ha permitido determinar un halo de inhibición del microorganismo en estudio.

Luego el cálculo de la inhibición se realizará mediante una regresión lineal.

III. MATERIALES, EQUIPO Y METODOLOGIA

MATERIALES

• 10 Placas Petri con Agar manitol salado

• S. aureus aislado de muestra de alimentos

• Agua destilada

• Pipetas estériles de 1, 2, 10 mL

• Contador de colonias

• Plumones marcadores

• Mechero

• Aza siembra

• Alcohol

• Papel filtro

• Perforador

• Aceite esencial de canela o de orégano.

EQUIPOS

• Estufa regulada a 37 °C

METODOLOGIA

• Sembrar mediante el método estriado S. aureus en 10 placas con agar manitol salado.

• Untar los discos de papel filtro con soluciones de aceite esencial en las siguientes concentraciones porcentuales (v/v): 1, 10, 30, 50 y 100.

• Colocar 6 discos con cada concentración en las placas sembradas. Finalmente se obtendrán 5 placas, cada una con discos a distintas concentraciones. Realizar por duplicado.

• Incubar a 37°C por 48 horas.

• Observar el halo de inhibición de los microorganismos en las placas, midiendo la medida del halo mediante le vernier.

• Calular la inhibición mediante una regresión lineal (utilizar Excel adjunto). Graficar.

IV. RESULTADOS

V. DISCUSIÓN

Indicar resultados y comparar con trabajos de investigación similares

VI. CONCLUSIONES

Realizar en base a las competencias indicadas.

VII. REFERENCIAS BILIOGRAFÌCAS

 Mendo, M. 2005. Medios de cultivo en microbiología. 5ta Edición. Ediciones Laborales S.R.L.

VIII. ANEXOS

Adicionalmente añadir un trabajo de investigación que hable sobre el uso del aceite esencial en la inhibición de microorganismos y su uso en la industria alimentaria.

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