Identificación de Metabolitos Secundarios

Práctica 2. Identificación de Metabolitos Secundarios

Reactivos

2mL HCl al 5,

5 gotas HCL 50%

0.5mL HCl concentrado

2 gotas del reactivo de Dragendorff (solución a: nitrato de bismuto y ácido nítrico al 30% y solución b: yoduro de potasio 50mL)

cuatro gotas de acetato de plomo al 1%

5 gotas de hidróxido de sodio al 50%

1 mL de piridina

4 gotas de nitroprusiato de sodio

11 mL de cloroformo

2 mL de anhídrido acético

3 mL de ácido sulfúrico concentrado

Material

10 Tubos de ensayo 13x100

4 tubos de ensayo de 16x150

gradilla para dichos tubos

Procedimiento

A. Identificación de Alcaloides (Dragendorff)

1.- Homogenizar perfectamente el extracto.

2.- Coloque en un tubo de ensayo de cristal 0.5 mL del extracto.

3.- En seguida adicione 2 mL de HCl al 5 %, y homogenice.

4.- A continuación añada 2 gotas del reactivo de Dragendorff.

5.- La formación de un precipitado de color naranja a rojo indica la presencia de alcaloides.

B. Identificación de Fenóles

Prueba para taninos

1.- En un tubo de ensayo coloque 5 mL del extracto

2.- Añada cuatro gotas de acetato de plomo al 1%

3.- La formación de un precipitado de color amarillo, indica la presencia positiva de taninos.

Prueba para flavonoides

1.- colocar en un tubo de ensayo 1 mL del extracto

2.- añada 5 gotas de hidróxido de sodio al 50 %

3.- La reacción es positiva si se presenta un color amarillo intenso el cual desaparece al añadir 5 gotas de HCl.

C. Identificación de Glicósidos

1.- En un tubo de ensayo coloque 2 mL del extracto

2.- Añada 0.5 mL de HCl con. y deje incubar a temperatura ambiente por 4 h

3.- Tras este tiempo, agregue 1 mL de piridina y homogenice

4.- Añada cuatro gotas de nitroprusiato de sodio y homogenice

5.- Proceda a álcalinizar la solución con hidróxido de sodio al 50% (aprox. 1 mL)

6.- La aparición de un color rosa-rojo indica una prueba positiva.

Saponinas

1.- En un tubo de ensayo coloque 3 mL del extracto

2.- tápelo con papel parafilm o un tapón de plástico

3.- Agite vigorosamente por 10 min continuos

4.- Deje reposar por 30 min

5.- La prueba es positiva si se forma una espuma de 1cm la cual persiste por más de media hora.

 D. Identificación de Terpenos (Liebermann-Burchard)

Triterpenos

1.- Coloque en un tubo de ensayo de cristal 5 mL del extracto.

2.- Adicione lentamente por las paredes 1 mL de cloroformo.

3.- En seguida añada, de igual manera, 1 mL de anhídrido acético

4.- Y con sumo cuidado adicione después 2 mL de ácido sulfúrico concentrado

5.- Se consideró positiva la reacción ante la presencia de un disco rojo violeta. Esteroides

1.- En un tubo de ensayo coloque 1 mL del extracto seguido de 10 mL de cloroformo, el cual dejara caer lentamente por las paredes.

2.- Añada a continuación 1mL de anhídrido acético, lentamente.

3.- Y con mucho cuidado, también por las paredes, proceda a añadir 1mL de ácido sulfúrico

4.- La capa superior se tornará roja y la capa de ácido sulfúrico presentará un color amarillo fluorescente verde si hay presencia de esteroides.

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