IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS

IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS.

OBJETIVO GENERAL:

Identificación de metabolitos secundarios mediante pruebas químicas rápidas de coloración y/o precipitación sobre muestras de plantas frescas

OBJETIVOS PARTICULARES:

• Identificar los principales metabolitos secundarios.

• Que el alumno aprenda las principales tecinas de identificación así como el fundamento

INTRODUCCIÓN

Los metabolitos secundarios cumplen una función específica para cada planta, algunos son responsables de olores y colores característicos, causticidad, y otros comunican sus virtudes medicinales o tóxicas a las plantas.

1. ALCALOIDES: Los alcaloides son bases nitrogenadas, las cuales pueden convertirse en sus respectivas sales mediante la adición de un ácido diluido y formar precipitados al adicionar los llamados reactivos para alcaloides. En esta práctica utilizaremos los reactivos de: Mayer y Dragendorff, haciendo la aclaración de que existen otros reactivos para realizar esta prueba.

2.-ESTEROIDES Y/O TRITERPENOIDES

3.-. SAPONINAS

4. FLAVONOIDES

5. QUINONAS

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL PARA EL RECONOCIMIENTO DE

ALCALOIDES:

• Aproximadamente 5 g del material vegetal fresco (o seco en polvo), macerar en un mortero, pasar a un beaker o erlenmeyer, adicionar un volumen suficiente de ácido clorhídrico al 5% que cubra la muestra; calentar al baño maría durante 10 minutos, enfriar y filtrar.

• Colocar en dos tubos de ensayo aproximadamente 0.5 ml del filtrado ácido, agregar a cada uno de los tubos previamente rotulados con el respectivo nombre del reactivo, 2 gotas de los reactivos de: Dragendorff, Mayer. Si se observa turbidez o precipitado en los dos tubos se considera que la muestra contiene alcaloides (Prueba presuntiva).

RECONOCIMIENTO DE ESTEROIDES Y/O TRITERPENOIDES:

• En un beaker limpio y seco, tomar una pequeña cantidad de muestra seca y molida, adicionar diclorometano en cantidad suficiente que cubra la muestra (realice esta prueba bajo campana extractora de gases) agitar con varilla de vidrio para realizar una mejor extracción, filtrar sobre sulfato de sodio anhidro.

• En un tubo de ensayo limpio y seco tomar 1 ml del filtrado orgánico y agregar por la pared del tubo 1 ml de anhídrido acético y con precaución 1-2 gotas de ácido sulfúrico concentrado. La aparición de coloraciones: verdes, azules, rojas o violeta es prueba positiva (+) para esteroides y/o triterpenoides en la muestra.

RECONOCIMIENTO DE SAPONINAS:

• Tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco y macerar en un mortero, adicionar suficiente cantidad de agua que cubra la muestra, filtrar a través de gasa, pasar 4 ml del filtrado a un tubo de ensayo y agitar vigorosamente durante un minuto, si se forma abundante espuma, estable aproximadamente 5 minutos es prueba presuntiva de la presencia de saponinas en la muestra.

RECONOCIMIENTO DE TANINOS:

• Tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco, macerar en un mortero hidratando la muestra para facilitar el rompimiento de los tejidos, pasar la muestra completamente macerada a un beaker y adicionar cantidad suficiente de agua para cubrir la muestra, calentar en baño maría de 10 a 15 minutos, filtrar en caliente.

• Tomar 1 ml del filtrado en un tubo de ensayo y adicionar dos (2) gotas de solución de tricloruro férrico (FeCL3 al 1%). La aparición de un color verde, azul o negro es prueba positiva (+) para compuestos fenólicos; en un segundo tubo de ensayo tomar otro mililitro del filtrado y agregar unas gotas de gelatina- sal, si hay turbidez o formación de precipitado es prueba positiva para taninos en la muestra.

Las dos pruebas son necesarias para comprobar la presencia de taninos.

RECONOCIMIENTO DE FLAVONOIDES:

• Macerar en un mortero aproximadamente 5 g del material vegetal finamente picado, pasar a un beaker o erlenmeyer, adicionar suficiente cantidad de etanol que cubra la muestra; calentar al baño maría durante cinco minutos, enfriar y filtrar.

• Tomar un 1 ml del filtrado etanólico en un tubo de ensayo, agregar varias limaduras de magnesio y por la pared del tubo dejar caer lentamente HCl concentrado (37%) la aparición de colores: naranja, rojo, violeta ó rosado, indican que la prueba es positiva (+) para flavonoides.

RECONOCIMIENTO DE QUINONAS:

• Pesar aproximadamente 0,5 g de material vegetal en polvo en un beaker de 100 ml, adicionar 20 ml de etanol al 95% y calentar en baño maría durante 5 minutos hasta ebullición para realizar la extracción de la muestra

• Filtrar en caliente, tomar 5ml del filtrado y adicionar aproximadamente 3 ml de H2SO4al 10%, calentar en baño maría, durante 15 minutos hasta ebullición para producir la hidrólisis; enfriar la muestra y realizar la extracción de las quinonas con 5 ml de tolueno (usar el tolueno bajo campana extractora) agitar suavemente sin emulsionar

• Tomar 2ml de la fase orgánica en un segundo tubo de ensayo, adicionar aproximadamente 1 ml de hidróxido de sodio al 5% en amoníaco al 2%. Luego de agitar se obtiene un color rojo cereza en la capa acuosa, lo que indica presencia de quinonas en la muestra. plantas ricas en saponinas

• Composición

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