Practica De Laboratori

IESTP DANIEL ALCIDES CARRIÓN

CARRERA PROFESIONAL TÉCNICA EN FARMACIA

GUÍA DE PRÁCTICA

BIOQUÍMICA

CÓDIGO : 323-F

CICLO : III

Última

Revisión : Q.F. OSCAR ALBERTO MUGURUZA LÓPEZ

2013

LIMA - PERÚ

CARRERA PROFESIONAL TÉCNICA EN FARMACIA

Asignatura: Bioquímica Código: 323-F

PRÁCTICA Nº 1

DETERMINACIÓN DE PH Y SISTEMAS BUFFER

1.1. Introducción:

El pH (potencial de hidrógeno) es una medida de la acidez o alcalinidad de una disolución. La escala de pH típicamente va de 0 a 14 en disolución acuosa, siendo ácidas las disoluciones con pH menores a 7 y alcalinas las que tienen pH mayores a 7. El pH = 7 indica la neutralidad de la disolución. El pH se puede medir de forma aproximada mediante el uso de reactivos indicadores de pH o de forma precisa mediante el uso del potenciómetro.

Un sistema buffer es aquella solución que resiste a un cambio en el pH por la adición de ácidos o bases. Este hecho es de vital importancia, ya que solamente un leve cambio en la concentración de hidrogeniones en la célula puede producir un paro en la actividad de las enzimas. Se puede obtener mezclando en las proporciones adecuadas un ácido débil con su sal o una base débil con su sal.

1.2. Objetivo:

Determinar el pH de un alimento y la importancia de los sistemas buffer en el organismo.

Método: Método colorimétrico y método potenciométrico.

1.3. Materiales y Equipos:

A. Materiales e indumentaria proporcionada por los alumnos:

• Los alumnos ingresarán al laboratorio con guardapolvo, cabello recogido en un moño alto, con zapatos cerrados y sin objetos colgantes como pulseras, aretes largos o anillos.

• Los ensayos se realizarán con mascarilla, gorro cobertor, guantes descartables y lentes de protección (de uso personal).

• Muestras: Leche, jugos de frutas.

B. Materiales y Equipos:

Materiales Cantidad Observación

Beaker graduado, 100 ml 5

Beaker graduado, 150 ml 5

Goteros de plástico 10

Gradillas 5

Papel indicador universal 2 x mesa

Papel tornasol rojo 2 x mesa

Papel tornasol azul 2 x mesa

Lentes de protección 5 Cada alumno deberá traer sus propios lentes

Picetas c/agua destilada 5

Pipeta graduada, 2 ml 5

Pipeta graduada, 5 ml 5

Pipeta graduada, 10 ml 5

Propipetas 5

Tubos de ensayo 15 x 125 30

Tubos de ensayo 16 x 150 10

Equipos

Potenciómetro 1

C. Reactivos

Para la entrega de reactivos se considerará un aproximado de 5 alumnos por mesa de trabajo.

Reactivos Concentración Cant. (*)

Ácido clorhídrico 0.1 N 100 ml

Hidróxido de sodio 0.1 N 100 ml

Rojo de metilo 0.1% 20 ml

Fenolftaleina 1% 20 ml

Anaranjado de metilo 0,1% 20 ml

Buffer pH 10 50 ml

Buffer pH 4 50 ml

Buffer pH 7 50 ml

Ácido acético 0,1 N 50 ml

Acetato de sodio 0,1 N 30 ml

1.4. Procedimiento

.

A. Análisis Colorimétrico con Papeles Indicadores de pH.

• Determinar el pH de soluciones diluidas de HCl e NaOH utilizando papel indicador universal Tornasol rojo y azul.

• Determinar el pH de una muestra, mediante el uso de cintas colorimétricas y la cartilla de colores para interpretación del valor del pH.

B. Análisis Colorimétrico con reactivos indicadores de pH.

• Determinar el pH del ácido clorhídrico 0.1 N y del hidróxido de sodio 0.1 N con los reactivos indicadores de pH: fenolftaleína, rojo de metilo y anaranjado de metilo. Comparar resultados.

Importante: No emplear potenciómetro para leer el pH del ácido y del hidróxido, bajo riesgo de deterioro del equipo.

C. Análisis Potenciométrico.

• Reconocimiento del Potenciómetro.

• Procedimiento de calibración del potenciómetro. Uso de buffers calibradores.

• Determinar el pH de diferentes muestras líquidas proporcionadas por los alumnos.

Verificar el uso, limpieza y los tipos de muestras a leer, tomando la precaución de que no sean muy ácidas ni muy básicas para garantizar el normal funcionamiento del equipo (No medir pH de ácidos ó de hidróxidos directamente del frasco).

Es imprescindible que después de emplear el equipo, el electrodo sea enjuagado con: agua destilada, guardar el electrodo en el capuchón con la solución de almacenamiento

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