Aislamiento De Bacterias

Objetivo:

Aprender eficasmente el metodo de siembra de bacterias asi como su tecnica adecuada y manejo de instrumentos que se utilicen mediante la realizacion de dicha practica.

Introduccion

Las bacterias son microorganismos unicelulares que presentan tamaños de algunos micrómetro de largo y diversas formas incluyendo esferas, barras y hélices.

Estas son procariotas y, por lo tanto, no tieen nucleo ni orgánulos internos.

Son los organismos mas abundantes del planeta. Son ubicuas, encontrándose en todo hábitat de la tierra, creciendo enel suelo, en manantieales, etc, en cualquier lugar favorable para su reproducción.

Algunas de estas bacterias pueden sobrevivir incluso en condiciones extremas.

Las bacterias son imprescindibles para el reciclaje de los elementos, pues muchos pasos importantes de los ciclos biogeoquímicos dependen de estar.

En el cuerpo humano hay aproximadamente diez veces tantas células bacterianas como células humanas, con una gran cantidad de bacterias en la piel y en el tracto digestivo. Aunque el efecto protector del sistema inmuno hace que la gran mayoría de estas bacterias sea inofensiva o beneficioa, algunas bacterias patógenas pueden causar enfermedades infecciosas, incluyendo cólera, sífilis, lepra, difteria, escarlatina etc. Las enfermedades bacterianas mas comunes y mortales son las enfermedades respiratorias, con una mortalidad solo para a tuberculosas de cerca de dos millones de personas al año.

Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaños y formas. La mayoría presentan un tamaño diez veces menor al de las células eucariotas, es decir, entre 0.5 y 5 um.

La forma de las bacterias es muy bariada y, a menudo , una misma especia adopta distintos tipos morfológicos, lo que se conoce como pleomorfismo. Aun asi podemos distinguir 3 tipos fundamentales de bacterias

- Coco ( del griego Kokkos, grano): forma de esfera

- Bacilo ( del latin baculus, varilla): forma de baston

- Helicoidales: vibuio, espirilo y espiroqueta.

Tinciones:

Las tiones son compuestos organicos en su mayoría que tienen cierta afinidad por los materiales celulares.

Estos los utilizamos ya que el tamaño de la mayoría de las células es un poco difícil de ver con el microscopio óptico. Otra gran dificultad es la falta de contraste de la celula con el medio que este la rodea por lo cual se utilizan estos colorantes.

Tincion de GRAM

La tinción de GRAM es uno de los métodos mas importantes de tinción en un laboratorio bacteriológico.

La secuencia de tinción es la siguiente: el Frotis fijado con calor se tiñe 1 min con Violeta Cristal, se lava con agua, se cubre con solución Yodada durante 1 min y se lava de nuevo con agua, decolorar con mezcla alcohol etílico/acetona. Escurrir y cubrir con Safranina (color de contraste) durante 20 seg. Lavar y secar.

Esta tinción se denominada así por el bacteriólogo danés Christian Gram.

Estas se distingen por la forma en que se tiñen debido a las diferencias de la estructura de la pared celular. El material principal que les provee rigidez es el peptidoglicano. La pared gram-positiva es gruesa y con varias capas de peptidoglicano a su vez la gram-negativa contiene una capa delgada de peptidoglicano.

Tinciones Habituales

RODAMINA-AURAMINA

Los ácidos micólicos de las paredes celulares de las micobacterias poseen afinidad para los fluorocromos auramina y rodamina. Estos colorantes se fijan a las bacterias, que aparecen de color amarillo o naranja brillante contra un fondo verdoso. El permanganato de potasio, empleado como contraste, evita la fluorescencia inespecífica. Todos los microorganismos ácido-alcohol resistentes, incluyendo

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