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Identificación y aislamiento de bacterias Escherichia coli(Escherich T. 1885)


Enviado por   •  3 de Agosto de 2022  •  Prácticas o problemas  •  1.494 Palabras (6 Páginas)  •  328 Visitas

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Universidad tecnológica de corregidora

microbiología

proyecto cuatrimestral

                

Identificación y aislamiento de bacterias Escherichia coli(Escherich T. 1885), presentes en la lengua de los canes mediante cultivos de agar Eosina azul de metileno(EMB).

Grupo:

QI-302

Integrantes del equipo:

  1. Castillo Toribio Karla Itzel

2. Guerrero Matehuala Karen

3. Pegueros Rábago Jimena

4. Villalobos Pérez Aziel

INTRODUCCIÓN

“La bacteria Escherichia coli coloniza el intestino del hombre pocas horas después del nacimiento y se considera de flora normal” estas bacterias se encuentran en el intestino del hombre de manera que también le ofrecen cierta protección contra algunas infecciones que se puedan adquirir de esta manera; sin embargo, esta bacteria consta de 6 grupos de E.coli que pueden ser patógenas produciendo diferentes malestares en la persona.

Para  poder determinar si son bacterias patógenas se utilizan diferentes técnicas bioquímicas, estas técnicas nos permiten conocer y/o diferenciar las características que poseen ciertas bacterias de manera que podamos identificar a qué grupo o familia pertenecen.

Así mismo existe otra manera de conocer una de sus clasificaciones como si es positiva o negativa, para esto se encuentra la tinción de gram, que es un método que se utiliza en las bacterias para separarlas en dos grupos, las que poseen una pared celular con mayor espesor (positivas) o las que su pared celular es muy delgada (negativas), en esta tinción se realizan múltiples pasos para al final obtener una coloración morado/ violeta para las Gram positivas y rosado para las gram negativas.

MARCO TEÓRICO

La Escherichia coli  (Escherich T. 1885) es un tipo de bacteria miembro de la familia de las enterobacterias, forma parte de la microbiota intestinal de animales de sangre caliente y humanos. La mayor parte de las especies de E. coli no son dañinas, en cambio, ellas se encargan de desplazar microorganismos más peligrosos fuera del cuerpo humano, además es responsable de la producción de insulina en el organismo, lo que a su vez; en la industria de salud es punta de lanza en algunos de los tratamientos contra la diabetes.

El agar EMB es un medio de cultivo selectivo y diferencial de enterobacterias y otras

especies de bacilos Gram negativos, contiene lactosa, sacarosa, fosfato dipotásico, agua  peptona que favorece el crecimiento microbiano e indicadores de eosina y azul de metileno que inhiben una amplia variedad de bacterias Gram positivas por eso se considera selectivo. Por otra parte, es un medio diferencial, ya que la eosina y azul de metileno forman un precipitado en pH ácido y las bacterias fermentadoras de lactosa presentan un característico brillo metálico como la Escherichia coli. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. [1]

La tinción Gram se refiere a una técnica diferencial que nos permite hacer una separación taxonómica entre bacterias gram positivas o negativas, las gram positivas se diferencian principalmente por poseer una pared celular con más espesor que las gram negativas.

La bacteria Escherichia coli pertenece a un grupo de bacterias llamadas enterobacterias. Las Enterobacterias son una gran familia de bacterias gramnegativas que se caracterizan por ser anaerobios facultativos, con forma de varilla, negativos a la oxidasa, que fermentan la glucosa en ácido y / o dióxido de carbono. Generalmente móviles, tienden a tener una longitud de 1-5 µm. Las Enterobacterias no patógenas se consideran "organismos indicadores" en la industria alimentaria. (Enterobacterias - Microorganismos, n.d.)

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Al hacer la tinción y poder diferenciar entre una positiva y negativa nos tenemos que fijar en la coloración que adquieren estas, si es positiva tendrá una coloración morada mientras que la negativa tendrá un color rosado.

Para identificar alguna bacteria en específico se necesitan normalmente las pruebas bioquímicas, estas pruebas son los análisis correspondientes que nos permiten señalar la presencia o ausencia de algunos compuestos químicos que nos ayudan a identificar especies microbianas.

Estas pruebas son esenciales para la caracterización de especies y cepas de bacterias, hongos, arqueas y demás organismos microscópicos, ya que son muy comúnmente utilizadas para determinar aspectos importantes del metabolismo. (Parada, 2021). Las más cómunes para E.coli es la prueba de rojo de metilo 99% de positividad para cepas de E. coli. y la prueba del indol demuestra la capacidad de ciertas bacterias para descomponer el aminoácido triptófano en indol, que se acumula en el medio.(Admin Heading. (2020, 10 agosto))

OBJETIVO.

  • Identificar y aislar las bacterias Escherichia coli, presentes en la lengua de los canes a través de cultivos agar Eosina azul de metileno(EMB), para así obtener una visualización mediante una tinción Gram.

CRONOGRAMA

DÍA

PROCEDIMIENTO

FECHA TENTATIVA

1

Preparación de medios de cultivo Agar EMB

8 de junio 2022

2

Tomar las muestras de la lengua de los canes y colocarla en una placa.

Realizar el aislamiento por el método de estría cruzada

Posteriormente, rotular las cajas anotando el nombre de cultivo, muestra, fecha, etc. Incubar a 37º C . Durante 72 horas

9 de junio 2022

4

Tiempo de incubación.

Invertir las placas evitando que el agua de condensación afecte el cultivo.

10 de junio 2022

5

Tiempo de incubación.

Invertir las placas evitando que el agua de condensación afecte el cultivo.

 

11 de junio 2022

6

Meter al refrigerador

12 de junio 2022

7

Hacer la tinción Gramm

16 de junio 2022

8

Recolección de resultados y reporte de investigación

13 de julio 2022

...

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