Analisis instrumental. Práctica No. 1 Espectrofotometría

Práctica No. 1

Espectrofotometría

Enrique de León (201110335), Rolando Echeverría (201315023), Domenika Salas (201701489), Keli Herrarte (201701560).

Departamento de Bioquímica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de Guatemala, Carrera de Química Biológica

INTRODUCCIÓN

La espectrofotometría se refiere al suceso por el cual, al momento de incidir un haz de luz de determinada longitud de onda sobre una muestra, parte de dicha luz es absorbida y la otra parte es transmitida o reflejada (Mora, 2007, p. 10). Se busca determinar experimentalmente el espectro de absorción de una sustancia conocida, aprender a determinar la concentración de una solución y realizar una curva de calibración empleando métodos espectrofotométricos.

METODOLOGÍA

Material y Equipo:

• Espectrofotómetro
• Cubetas
• Tubos de ensayo
• Gradilla
• Pipetas volumétricas

Reactivos:

• Soluciones de cloruro de cobalto a 0.01 M, 0.05 M, 0.1 M, 0.15 M, 0.2 M en HCl 1%
• HCl 1%

Técnica utilizada:

La técnica utilizada en la práctica fue la espectrofotometría aplicando la ley de Lambert-Beer que estableció que la absorbancia está directamente relacionada con las propiedades intrínsecas del analito. Consistió en colocar 5 muestras de Cloruro de Cobalto (CoCl2) en cubetas plásticas a diferentes concentraciones en un espectrofotómetro, para luego obtener una lectura de máxima absorbancia a cierta longitud de onda, utilizando como blanco HCl al 1%. La información proporcionada anteriormente, nos permitió realizar una curva de calibración con los datos de absorbancia y las concentraciones de CoCl2 obtenidas. Por último, se determinó la absorbancia de una muestra problema de CoCl2, y se determinó la concentración de la misma en base a la curva de calibración y la ecuación encontrada proveniente de la regresión lineal que explicó el comportamiento de los datos obtenidos y su relación entre ellos.

RESULTADOS

Tabla No.1. Determinación de la Absorbancia a distintas soluciones con concentraciones crecientes de CoCl2 a una longitud de onda de 512 nm.

Fuente: Datos experimentales, obtenidos en el Laboratorio No.1 de Bioquímica, Edificio T-12, USAC.

nm= Nanómetros

M = Molaridad

En la Tabla No.1 se observa el aumento de la absorbancia la cual fue medida a 512 nm debido a los datos obtenidos en el barrido y se observa que es directamente proporcional al aumento de la concentración de las soluciones de cloruro de cobalto

Gráfica 1. Concentración Vs Absorbancia de las soluciones de distintas concentraciones de CoCl2. [pic 1]

Fuente: Datos experimentales, obtenidos en el Laboratorio No.1 de Bioquímica, Edificio T-12, USAC.

En la gráfica No.1 se puede observar la relación creciente de la absorbancia con respecto a la concentración de la solución.

Tabla No.2 Resultados de la determinación de la concentración de la muestra desconocida de Cloruro de cobalto a una longitud de onda de 512 nm.

Fuente: Datos experimentales, obtenidos en el Laboratorio No.1 de Bioquímica, Edificio T-12, USAC.

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