Apuntes de biotecnología farmacéutica

GUIA DE BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA PRIMER PARCIAL

¿Qué es la biotecnología farmacéutica?

Ciencia que engloba todas las tecnologías requeridas para el desarrollo, producción y comercialización de biofármacos a partir de organismos vivos

Demostraron el uso de las endonucleasas de restricción y su aplicación para insertar en vector: Boyer and Cohen

Conformaron la empresa Genentech: Robert Swanson y Herbert Boyer

Comercializan la primera insulina humana en 1982: Genentech y Ely Lily

Primera proteína humana recombinante expresada en bacterias en 1977: Somatostatina

¿Que involucra la terapia génica? La introducción de un gen en el complemento genético de la célula

¿Qué células conforman el hibridoma? células de mieloma con células del bazo

¿Qué es la replicación y en qué fase del ciclo celular se realiza?

Síntesis de una molécula de ADN a partir de una progenitora y se realiza en la fase S.

¿Cuáles son las características de la replicación?

Semiconservadora, Simultánea en ambas hebras, Secuencial, Bidireccional, Origen monofocal y Bifocal.

¿Cuáles son los requerimientos de la replicación?

Cebador. fragmento de hebra que aporta un grupo 3’-oh. oligonucleótido (generalmente RNA) apareado al progenitor DNA

Sustratos. se utilizan los cuatro trifosfatos de deoxinucleótidos (dNTP‘s)

Cofactores. elemento metálico divalente asociado a los dNTPs. los sistemas biológicos utilizan mg+2 Molde. hebra parental sobre la que se irán uniendo los nucleótidos complementarios

Etapas de la replicación: Iniciación, Elongación, Terminación

¿Enzimas que participan en la replicación? Helicasa, primasa (tipo RNA polimerasa), DNA polimerasas, topoisomerasa I, ligasa, primasa, telomerasa y nucleasa.

¿Qué es la transcripción? Síntesis de molécula de RNA a partir de la información genética contenida en la región codificante de un DNA

Diferencias entre la transcripción eucariota y procariota: En la procariota la traducción es inmediata a la transcripción y en la eucariota el ARN es pasado por un proceso de maduración en el núcleo y transportado al citoplasma para ser traducido.

Transcribe el pre-RNA 45S, precursor DE rRNA componentes del ribosoma: RNAPol-I

Transcribe todos los genes de proteínas: nucleares heterogéneos (hnrna, son precursores de mrna) y nucleares pequeños (snRNA): RNAPOL-2

Transcribe los genes de todos los tRNA sintetizando sus precursores respectivos, así como al precursor de 5s ribosomal: RNAPOL-3

• LAS RNA POLIMERASAS SE LOCALIZAN EN EL NUCLEOPLASMA O EN EL NUCLEOLO
• LA AMANITINA ES UN INHIBIDOR SELECTIVO DE LAS POLIMERASAS, QUE LAS PERMITE DISTINGUIRLAS EXPERIMENTALMENTE
• RNA POLIMERASA DE PROCARIOTAS CONTIENE 4 SUBUNIDADES, LA DE EUCARIOTAS CONTIENE HASTA 12

¿Qué es la traducción? proceso en el que los ribosomas localizados en el citoplasma celular sintetizan proteínas a partir de RNA generado por medio de la transcripción

Componentes de la traducción: Una molécula de trna para iniciar la traducción, 31 tipos de tRNAs portadores de aminoácidos como aminoacil-tRNAs, ribosomas, formados por rRNAs y proteínas, un mRNA que codifique para cada proteína, factores protéicos de inicio, elongación y terminación de la síntesis

¿Qué es el código genético? conjunto de pautas que rigen la transferencia de la información contenida en el mRNA (y por lo tanto del DNA) para la síntesis de proteínas.

¿Qué es un gen? Región del genoma que contiene la información necesaria para sintetizar una molécula de un polipéptido u otro RNA funcional

¿Qué es un CISTRON? región del genoma (dna o mrna) que codifica un producto génico único.

Menciona y describe las modificaciones post traduccionales ocurridas durante la expresión génica Adición o eliminación de nucleótidos (Generalmente en los extremos pre-ARN), El splicing (Eliminación de intrones y empalme de exones), Splicing alternativo (Cuando no todos los intrones aparecen en el ARN maduro o cuando se expresan intrones en el ARN maduro)

Menciona y describe las modificaciones post traduccionales ocurridas en el ADN

• MODIFICACIÓN COVALENTE DE NUCLEÓSIDOS
• ADICIÓN DE NUCLEÓTIDOS EN LOS EXTREMOS
• ESCICIÓN DE NUCLEÓTIDOS EN LOS EXTREMOS
• DIVISIÓN DE MOLÉCULA EN FRAGMENTOS
• ELIMINACIÓN DE INTRONES, EMPALME DE EXONES

¿Cómo se lleva a cabo la modificación del extremo 5’ formación del casquete (cap) 5’?

Primero se realiza una desfosforilación por medio de una fosfatasa en una purina generalmente. Después se transfiere un residuo guanilino por medio de una mrna guanililtransferasa.

Se forma la estructura particular cap que une a dos nucleótidos a través de un enlace trifosfato guanosina unida en sentido opuesto (p-p-p entre dos posiciones 5’).

Función de la CAP 5’: Protector frente a exonucleasas, marca RNA para uso posterior en otras reacciones, punto de unión del mRNA en los ribosomas.

Describe la modificación del extremo 3’: El extremo 3’ mRNA no corresponde con el punto final de la transcripción (del pre-mRNA), sucede una escisión del pre-mRNA upstream a su extremo 3’, se añade una cola de poliadenilato.

Describe la poliadenilación: La escisión ocurre entre 10 y 30 nucleótidos downstream del sitio de unión de CPSF, sobre el extremo 3-oh actúa una polimerasa llamada poli (a) polimerasa, añade entre 50 y 250 bases de adenilato que permanece intacto hasta la formación final del Mrna

Función de la Cola de Poliadeninas: Proteger al mRNA de degradación enzimática en el citoplasma, dirige su transporte del núcleo hacia el citoplasma, la hace más estable y aumenta su vida media, la hace más fácilmente purificable por métodos cromatográficos.

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