Bioseguridad y trabajo seguro en el laboratorio

Laboratorio No.1

BIOSEGURIDAD Y TRABAJO SEGURO EN EL LABORATORIO

Objetivos:

• Conocer los Aspectos básicos de bioseguridad y reglas generales de trabajo en el laboratorio de microbiología agrícola.
• Reconocer las metodologías existentes para la desinfección de superficies e implementos de trabajo.
• Aplicar algunos de los métodos de esterilización para medios de cultivo, materiales y accesorios utilizados en el laboratorio.

INTRODUCCION

Por definición se parte de la idea de que todo el personal que labore dentro de un laboratorio de microbiología trabaja con microorganismos infecciosos o con materiales que los contienen. Es decir que los microorganismos presentes pueden bajo ciertas condiciones producir enfermedad. Es por eso que es de vital importancia que toda persona que ingrese al laboratorio conozca y aplique correctamente los protocolos de bioseguridad dispuestos para mitigar o disminuir los riesgos de contaminación.

BIOSEGURIDAD

Normas generales para el trabajo en el laboratorio

1. Para ingresar al laboratorio se requiere de una bata limpia, abotonada y una cofia en donde todo el cabello se encuentre contenido.
2. Los libros, morrales y demás implementos personales se deben colocar en el lugar dispuesto para ello, no colocarlos encima de los mesones ni áreas de trabajo.
3. Las puertas del laboratorio permanecen cerradas para evitar las corrientes de aire.
4. No pipetee con la boca, utilice para ello pipeteadoras de bomba, micropipetas o el dispositivo que haya sido seleccionado.
5. Al inicio y al final de cada laboratorio limpie su mesón de trabajo con una solución desinfectante y deje los equipos usados y organizados una vez los haya terminado de usar.
6. Lave correctamente sus manos al entrar y al término de cada práctica.        
7. Está prohibido comer, beber, fumar y aplicarse maquillaje dentro del laboratorio. Siempre Utilice zapatos cerrados y lleve las uñas cortas, limpias y sin esmalte.
8. Al final de cada laboratorio, disponga el material contaminado en el recipiente designado para este fin.
9. Si usa guantes de látex al finalizar dispóngalos en el sitio designado para este tipo de residuos, evite tocar otras superficies como puertas y ventanas para evitar contaminación de estas.
10. En caso de un derrame o accidente informe inmediatamente al profesor o al asistente.

MÉTODOS DE ESTERILIZACION

ESTERILIZACIÓN POR MÉTODOS FÍSICOS:

MÉTODOS FÍSICOS

1. Calor seco (estufa u horno)

2. Calor Húmedo (autoclave)

3. Radiaciones ionizantes (gamma, beta y ultravioleta)

4. Ondas supersónicas (microondas odontológico)

5. Filtración

6. Ebullición

7. Flameo

1. Calor seco (estufa u horno): 

Utiliza altas temperaturas y aire circulante para esterilizar así las superficies de los objetos a esterilizar. 

 Se utiliza para materiales resistentes a altas temperaturas como metales, cerámicas y vidrio. No es recomendable para materiales plásticos, guantes y artículos de goma, frascos con                  líquidos acuosos, frascos con líquidos inflamables, algodón, gasa, y textiles, así como instrumental rotatorio (turbinas y        contrángulos). 

 Los ciclos de esterilización varian pero van desde 1 h a 170 °C o de 2 h a 160 °C. ya que las bacterias son más resistentes al calor seco            que al calor húmedo.

Ventajas del método: Es un método efectivo y seguro para esterilizar metales y espejos, pues no oxida o corroe y los bordes cortantes no pierden filo.

Desventajas del método: Necesita de un ciclo largo, de tener una penetración pobre y de destruir los elementos termolábiles.

2. Calor húmedo (Autoclave): 

 Método que utiliza el vapor de agua supercalentado sometido a una presión alta generando temperaturas por encima de los 120°C lo que asegura una inactivación de los microorganismos que puedan encontrarse dentro de la muestra a esterilizar.

El mecanismo de acción se basa en la capacidad de penetración del vapor saturado de alcanzar altas temperaturas con un gran poder de penetración, esta propiedad hace que los microorganismos presentes tengan que soportar temperaturas muy por encima de su límite de tolerancia (+/- 80°C) ocasionando ruptura de su membrana plasmática y denaturación de sus proteínas lo que ocasiona sus muerte.

Los Tiempos de esterilización van de 15 a 20 minutos con presiones desde 15 a 20 psi

Ventajas  del método:

a. El  ciclo necesario para la esterilización es corto

b. Se caracteriza por una buena penetración

c. Da la posibilidad de esterilizar gasas algodón, campos, gomas y otros materiales, así como de esterilizar instrumental rotatorio. 

Desventajas del método:

a. Los instrumentos cortantes pierden filo

b. Puede producir corrosión en metales. 

3. Radiaciones Ionizantes: 

      * Rayos gamma. Son radiaciones ionizantes que se usan en la industria de artículos médicos, odontológicos y farmacéuticos. Se caracterizan por una alta energía y gran penetración. Es un método costoso. 

      * Rayos beta. Se usan principalmente en la industria. Su poder de penetración es menor que el de las radiaciones gamma 

     * Rayos ultravioleta. Son radiaciones no ionizantes. No tienen efecto esterilizante sobre algunos microorganismos. Son de baja energía y escasa penetración. Su acción es superficial y se usan para mantener una baja tasa de  microorganismos en el quirófano y para mantener estéril el instrumental una vez que ha sido ya esterilizado.

Todas las radiaciones ionizantes producen como su nombre lo indica iones libres de moléculas esenciales para la vida como el ADN lo que genera daños irreversibles a las células ionizadas.

4. Ondas Supersónicas: Este aparato está formado por un foco emisor de alta frecuencia que causa vibraciones en las moléculas de los microorganismos. Dichas vibraciones se transforman, por fricción interna en calor y de esta forma se altera y se desactiva proteínas, enzimas y se rompe la membrana plasmática de los microorganismos.

5. Filtración: Es un proceso que impide el paso de microorganismos de un ambiente a otro. Se utiliza en la industria farmacéutica, en soluciones termolábiles que no pueden sufrir la acción del calor. Actualmente este método se usa en los compresores de aire que utilizan filtros coalescentes que filtran partículas hasta 0,001 ?m (99,9 % de pureza).

6. Ebullición: se pueden usar 2 tipos de líquidos: agua y aceite

• 0 Agua en ebullición. El agua hierve a 100ºC, este sistema ofrece todas las garantías de esterilización siempre y                      cuando se cumpla el tiempo en que el material debe permanecer en ebullición, para lograr la muerte de las bacterias,          no así las de las esporas que aún siguen resistentes. Aquí por supuesto no se puede esterilizar gasas, artículos de                papel (conos) etc. Tiempo de ebullición establecido: 20 minutos.
• 0 Aceite en ebullición. Para esto se utiliza un aceite especial volátil, aprovechando la ventaja de que el aceite hierve a          una temperatura mayor que la del agua, la que puede llegar a 300ºC. Desde luego, no hace falta que hierva, basta                con mantener el instrumental a 130ºC Tiempo de ebullición establecido: 20 minutos 

7. Flameo: Se trata del calor que produce una llama de gas o alcohol; es un procedimiento de emergencia y consiste en colocar directamente en la llama el objeto que se desea esterilizar. Con la llama se consigue una temperatura muy alta que puede exceder, en la de gas, los 1000ºC. Esta temperatura tan elevada deteriora el instrumento, y para evitarlo, se debe colocar por encima de la llama a fin de que no reciba directamente el calor de esta.

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