CIENCIAS DE LA SALUD . cromatografía en capa fina para identificar los componentes de una mezcl

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CIENCIAS DE LA SALUD

Mario Faustino Martínez Salinas

Desarrollo Analitico

I.Q. Arturo Caballero

Practica #3. Cromatografía en Capa Fina

Objetivo:

• Desarrollar una cromatografía en capa fina para identificar los componentes de una mezcla.

Fundamento:

La cromatografía en capa fina (en inglés thin layer chromatography o TLC) es una técnica analítica rápida y sencilla, muy utilizada en un laboratorio de Química Orgánica. Entre otras cosas permite:

• Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así, por ejemplo, la efectividad de una etapa de purificación.
• Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas. Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
• Realizar el seguimiento de una reacción. Es posible estudiar cómo desaparecen los reactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cuándo la reacción ha acabado.

La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lámina de plástico o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la lámina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclados (eluyente o fase móvil). A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.

Procedimientos:

1. Corte un pliego de papel filtro de forma rectangular de manera que quepa vertical en un vaso de precipitados de 800 ml.
2. Haga una línea a lápiz a 1 cm del borde inferior del papel, sobre la cual marcará puntos donde se aplicarán las muestras. Deje un margen de 1 cm de los bordes laterales.
3. Marque puntos sobre la línea cada 0.5 cm ó cada 1 cm dependiendo de la longitud del papel que recortó, de forma que le quepan 5 ó 6 puntos (dependiendo las aplicaciones que usted necesite). 4. Con un capilar, aplique sobre los puntos la muestra problema y los estándares puros. Dejar que sequen 5 min.
4. Agregue 10 ml. de eluyente, etanol, en la cuba cromatográfica. Dejar que se sature.
5. Correr la cromatografía.
6. Retirar la placa cromatográfica cuando el frente del eluyente esté a 1 cm del borde superior de la misma.
7. Comparar los estándares con la muestra e identificar los componentes de la misma.

Observaciones:

• Se retirarón 10ml del eluyente para que no cubriera la línea marcada.
• Fueron 20 min. en correr la cromatografía.
• Se hizo otro corte de papel filtro para mantener la humedad dentro de la cuba.
• Se elaboró una muestra problema de 3 colorantes.
• Los colores que se utilizaron fueron: rojo 40 , azul 1, azul 2 y amarillo 6.
• Se pudo observar como los colores corrían en el papel filtro y como tenían diferentes alcances.

Resultados:

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Discusión:

Al correr la cromatografía todos los colores corrían correctamente pero en la muestra problema se pudo observar la presencia de diferentes colores pudiendo así analizar de que estaba compuesta la muestra problema. Al comparar los estándares corridos con la MP se puedo observar levemente la coloración azul verdoso dando como resultó que ese color correspondía el estándar del colorante Azul 2. Sin los estándares no se hubiera podido tener resultados seguros de la MP.

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