DISCUSIÓN extraccion de DNA

DISCUSIÓN

Según Campbell y Reece 2, el DNA permanece dentro de las células de cada organismo vivo, es el encargado de almacenar la información genética de cada ser viviente, de transmitir esta herencia de generación en generación para la conservación de cada especie, fue aislado por primera vez en 1869 por el médico Suizo  Friedrich Miescher, pero no fue hasta 70 años después que se demostró su compleja estructura, siendo una macromolécula helicoidal bicatenaria con bases que se proyectan hacia el interior de la molécula desde las dos cadenas de polinucleótidos anti paralelas

Según De Robertis 3,  Su estructura en forma de cadena minúscula es visible al ojo humano, luego de su extracción y posterior aislamiento, con medios salinos, detergentes y etanol al 95% a una T° de -20 °C. En esta actividad se buscó la imagen del “Empaquetamiento del DNA”, la cual muestra las características de éste ácido nucleico en una muestra vegetal; es importante trabajar la muestra triturándola (lisis celular) o maceración del plátano, puesto que en ésta destrucción física se rompen las células y el DNA se separa del resto de los componentes celulares. El detergente se utiliza ya que su función consiste en disolver las membranas y que éstas se separen del resto de componentes, además actúa como una solución tampón en la que se separa el DNA, que además contiene NaCl, ya que los iones sodios interactúan con los grupos fosfato cargados negativamente del DNA. Así éstos no reaccionan con las moléculas de agua, debido que sus cargas (-) son bloqueadas por el sodio y el DNA se vuelve insoluble y precipita. En ese momento este buffer contiene DNA y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al DNA, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separado de él por acción del detergente, que en este caso fue champú, pero de misma función. Sólo resta extraer el DNA de esa mezcla de tampón y detergente, por lo cual se debe utilizar etanol al 95% a T° de – 20 °C dispuesto en el laboratorio. El DNA es soluble en agua, pero al entrar en contacto con etanol se desenrolla y precipita. Esta ayuda a purificar la muestra de ADN eliminando las proteínas presentes solubilizándolas, también se encarga de eliminar impurezas orgánicas. El producto filamentoso obtenido de la extracción no es completamente DNA puro, puesto que también hay entremezclado ARN, el cual no es posible visualizar. Es importante la T°, ya que el ADN desnaturalizado se enfría lentamente, las cadenas complementarias se aparean en forma ordenada, y se restablece la conformación original de la molécula Debido a éste factor es que nos es posible observar fibras de DNA en forma macroscópica y también en una muestra preparada de forma temporal con tinción de azul de metileno y vista en el microscopio óptico, en la cual se observó el DNA en forma de diminutos gránulos agrupados entre sí.

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