Extracción de DNA de tejido vegetal y animal
Enviado por hoyosloaiza • 21 de Noviembre de 2021 • Informes • 1.534 Palabras (7 Páginas) • 87 Visitas
INSTITUTO TECNOLÓGICO METROPOLITANO-FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y APLICADAS
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| Jaider Alexander Marín Olaya Johan Sebastián Hoyos Loaiza Yenifer López Vélez BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR BCO22-2 Grupo 5 Ing. Biomédico Hernán Darío Villota Bolaños |
INTRODUCCIÓN
Es importante reconocer la importancia que tiene la molécula de ADN en nuestra vida, ya que está presente tanto en vivos como químicos pues se transmiten de generación en generación. La metodología básicamente de este laboratorio es en una primera homogenización mecánica del tejido en una solución de extracción, esta extracción permite obtener el ADN más puro y menos degradable pero aun así se complica que tienen que utilizar disolventes orgánicos. Aunque el ADN puede ser purificado como se hizo en el ejercicio con etanol. Para poder así obtener ADN vegetal y animal de forma adecuada.
OBJETIVOS
- Aprender de manera práctica sobre las formas de extraer el material genético de una muestra tanto vegetal como animal.
- Aprovechar de manera beneficiosa los materiales que el laboratorio ofrece para extracción del ADN.
- Conocer como cada sustancia aplicada afecta de manera directa a la muestra (como pasa en la bicapa celular).
DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCESO DE EXTRACCIÓN DE ADN
- Preparación de buffer
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- Macerado
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FUNDAMENTO FÍSICO-QUÍMICO DE CADA UNA DE LAS ETAPAS DEL PROCESO Y FUNCIÓN DE CADA UNO DE LOS ELEMENTOS UTILIZADOS EN LA EXTRACCIÓN DEL ADN DE TEJIDO VEGETAL
El primer paso es la preparación de una solución amortiguadora de lisis que permite la ruptura de la membrana celular de las células. Para iniciar se agrega 120 ml de agua destilada a un recipiente, posterior se agregan 1.5 g de Cloruro de Sodio (NaCl) o sal de mesa, ya que, al añadir sal, los iones de sodio son atraídos por las cargas negativas del Ácido Desoxirribonucleico (ADN), neutralizando su carga y permitiéndole a las moléculas de ADN unirse y no repelerse, además la sal disminuye la solubilidad de las proteínas haciendo que se precipiten y que se separe más fácil el ADN. Posterior al paso anterior, se procede a agregar 5 g de bicarbonato de sodio (NaHCO3) con el propósito de mantener el pH balanceado y que las moléculas de ADN no se desintegren. Por último, se añaden 5 ml de jabón líquido, con la finalidad de destruir las membranas del tejido vivo, ya que los fosfolípidos son los principales componentes de la membrana nuclear y plasmática, y al ser una grasa se neutraliza con el jabón. Luego se sella la solución, se mezcla rigurosamente y se refrigera a 4°C durante 30 minutos para tener un nivel de acidez constante.
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