ESQUEMA DE PROCEDIMIENTOS DE MUESTRA

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
CENTRO DE BIOLOGÍA -Dirección de Investigación y Postgrado[pic 1]

ESUDIANTE: Danna Patricia Valverde Orozco        ASIGNATURA: Biología Celular

CARRERA: Medicina Veterinaria y Zootecnia        CURSO: Primero “B” FECHA:   05/02/2017

PRÁCTICA #: 11

TEMA: Hongos

1. ESQUEMA DE PROCEDIMIENTOS DE MUESTRA (flujo grama)[pic 2]

1. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS

1. Materiales

Asa de siembra

Placa portaobjetos

Caja Petri

Mechero o lámpara de alcohol

Frascos de muestra

Gotero

1. Equipos

Incubadora

Microscopio

Cámara de flujo laminar

Cámara cuenta colonias

1. Reactivos

Orina de cualquier especie animal

Agua destilada

Cristal violeta o violeta de genciana

Lugol

Alcohol cetona

Safranina o colorante secundario

1. METODOLOGÍA

1. Procedimiento

1. Obtener una muestra de orina y colocarlo en un base que contenga los datos del paciente, con la fecha en la que fue tomada la muestra.
2. Preparar con un día de anterioridad el medio de cultivo (en este caso agar EMB), siguiendo las instrucciones especificadas en el envase del fabricante.
3. Se coloca los materiales de manera que se encuentren al alcance de la mano.
4. Sujetar el asa y esterilizar de atrás hacia delante.
5. Destapar y homogenizar la muestra.
6. Sumergir el asa en el envase y tapar la muestra.
7. Hacer un estriamiento en la caja Petri con el medio de cultivo, en la cámara de flujo laminar, usando la técnica realizada anteriormente por el docente y al finalizar esterilizar nuevamente el asa.
8. Colocar la caja Petri dentro de la incubadora y dejar dos días.
9. Transcurridas las 48 horas dirigirse al laboratorio a concluir la práctica de urocultivo.
10. Sacar de la incubadora la caja Petri con el cultivo y llevarla a la cámara cuenta colonias, una vez contadas las colonias, llevar la caja a la mesa de trabajo.
11. Colocar sobre la mesa de trabajo todos los materiales y reactivos necesarios para realizar la tinción de gram.
12. Esterilizar el asa de siembra de manera correcta.
13. Tomar una colonia de la caja Petri, realizar un frotis en la placa portaobjetos y tapar la caja Petri, procurando que la lámpara esté siempre delante de la muestra.
14. Fijar la placa pasándola por la llama, evitando que ésta se caliente demasiado.
15. Colocar 3 gotas de cristal violeta o violeta de genciana por 10 segundos, y luego retirar con agua destilada.
16. Secar y colocar 3 gotas de lugol durante 10 segundos para fijar el colorante añadido anteriormente.
17. Añadir alcohol cetona para decolorar, transcurridos los 10 segundos retirar con agua destilada
18. Finalmente agregar 3 gotas de safranina dejándola actuar durante 10  segundos y retirar con agua destilada.
19. Realizar la observación con la ayuda del microscopio  e identificar el tipo de bacteria (Bacilos o cocos).

1. RESULTADOS E INTERPRETACIÓN

El estudiante debe anexar en forma ordenada todas las fotografías del proceso de la práctica, con la respectiva nominación.

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