EXTRACCION DE ADN POR METODOS SENCILLOS Y CASEROS

UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA    DE COLOMBIA

   FACULTAD DE CIENCIA

  PROGRAMA DE BIOLOGIA

EXTRACCION DE ADN POR METODOS SENCILLOS Y CASEROS

METODOLOGIA.

Todas las características de los seres vivos observables (fenotipo) y no observables (genotipo), su fisiología, comportamiento, entre otras características, se las debemos a el ADN (ácido desoxirribonucleico).

Lo que hablamos y conocemos hoy se lo debemos a Watson y Crick (James Dewey (Jim) Watson nació en Chicago, en 1928, y era un niño prodigio. Entró en la Universidad de Chicago a los quince años y se graduó a los diecinueve; tres años después obtuvo un doctorado por la Universidad de Indiana. Francis Crick nació en Northampton, Inglaterra, en 1916. Estudió física en la Universidad de Londres, y trabajó con radares durante la Segunda Guerra Mundial).

Pero su descubrimiento es irónico “irónicamente, el descubrimiento definitivo llegó poco después de que Crick y Watson asistieran a un seminario en el que parecieron malinterpretar la presentación que Franklin hizo de su investigación. Volvieron a Cambridge, construyeron un modelo e invitaron a la pareja de Londres para que lo viera (1).

La extracción del DNA en laboratorio comprende cinco pasos:

1. Ruptura   de las células
2. eliminación de proteínas,  
3. eliminación de ARN,
4. eliminación de proteínas    
5. Concentración del ADN,  

La verificación del ADN, de manera científica se debe soportar con espectrofotometría basada en las características de las bases nitrogenadas, también se puede analizar por electroforesis.

MATERIALES

• 1 vaso de precipitados de 500 ml o 1 matraz Erlenmeyer de 150 ml

• 2 recipientes graduados de 200 ml

• 1 probeta de 100 ml

• Agitadores de vidrio o de plástico, delgados

• Cuchillo y tenedor para cortar y hacer puré

• Papel encerado o plato de cartón

• Termómetro de mercurio

• Balanza analítica (0.01-200g)

• Parrilla de calentamiento (opcional)

• Embudo de cola larga con estrías

• Papel filtro Whatman 1, que quede en el embudo (colador), o una tela para filtrar

• Reloj o cronómetro

• 2 recipientes para baño maría

• 1 tubo de ensayo para cada miembro del grupo

• Gradilla para tubos de ensayo

• 1 gotero

• Gancho hecho de alambre de nicromel (opcional) o varilla de vidrio

• Soporte Universal con anillo metálico

SUSTANCIAS

• 50 ml de etanol frío (pureza no menor al 96%)

• 2 g de sal de mesa

• 10 ml de detergente líquido (no debe tener un color pronunciado).

•  Agua caliente

•  Hielo (o usar la nevera)

PROCEDIMIENTO

Material para la extracción del ADN puede ser frutos como uvas, banano, fresa, papaya, o cebolla,

arvejas,

1. Tenga 50 ml de etanol en un vaso de precipitados en la parte inferior de la nevera dos horas antes del experimento
2. Prepara la solución para extraer ADN:

En un vaso de precipitados de 200 ml, disuelva 2 gr de sal en 90 ml de agua. Luego agregó 10 ml de detergente líquido y agitar suavemente hasta homogenizar la solución

3. Prepare 5% de ablanda carnes, o papaína, adicionando 5 gr de ablanda carnes (enzima) a 95 ml de agua destilada, Puede reemplazar ablanda carnes por jugo de piña o papaya.

4. Prepare una solución de rojo fenol así. Unte la punta de un palillo de dientes en rojo de fenol y sumerja la punta en 100 ml de agua destilada agitando, la solución restante es de color ámbar claro, cuando el fenol es adicionado a una solución acida esta se torna rosada / roja.

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