Electroforesis
Enviado por carlossc23 • 9 de Marzo de 2014 • 741 Palabras (3 Páginas) • 342 Visitas
Fundamento.
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocadas en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo).
La separación electroforética es una de las técnicas más empleadas en Bioquímica y consiste en
la separación de moléculas cargadas (en este caso, aminoácidos) en presencia de un campo
eléctrico. Al existir una diferencia de potencial que genera un campo eléctrico, las moléculas se
desplazarán hacia el polo positivo (ánodo) o hacia el polo negativo (cátodo), en función de su
carga eléctrica. La velocidad de migración electroforética de una molécula dada depende la
carga eléctrica, de las dimensiones moleculares y del soporte empleado. Para realizar una
electroforesis se necesita una fuente de alimentación (que genera la diferencia de potencial), una
cubeta y un soporte (papel o diferentes geles de acetato de celulosa, agarosa o poliacrilamida).
En el caso de moléculas pequeñas como los aminoácidos, se utiliza el papel como soporte. Así,
se deposita una muestra de la solución problema (por ejemplo una mezcla de aminoácidos) Veronica Gonzalez Núñez -12-
sobre la tira de papel, que hace de puente entre los dos polos (que se encuentran en dos
cubetas con tampón a un pH determinado). La fuente de alimentación se enciende, generando
un campo eléctrico y transcurrido un cierto tiempo, se apaga, se retira el papel, se revela con un
reactivo apropiado y se identifican los componentes de la mezcla. La carga neta de cada
aminoácido al pH en el que tiene lugar la electroforesis determinará la dirección y la velocidad de
la migración electroforética. De esta forma, se pueden separar los aminoácidos presentes en una
mezcla en disolución.
- Aquellos aminoácidos cuyo pI = pH del tampón de electroforesis no presentarán carga neta, ya
que la forma predominante es el Zwitterion o ion dipolar; dichos aminoácidos no presentarán
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